人EGF受体胞外域在大肠杆菌中表达、复性及抗原性鉴定

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目的 构建人EGF受体(EGFR)胞外域的原核表达载体并在大肠杆菌中表达,制备EGFR特异性抗体,对表达产物进行鉴定。方法 以PCR方法从克隆的EGFR胞外区cDNA中扩增编码胞外结构域L1、S1、L2(EGFR-LSL)的DNA片段,并在其3′端加入编码His6标签的序列,与pET-3c连接构建EGFR-LSL原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达;同时以纯化的EGFRL2结构域蛋白(EGFR-L2)制备抗血清,以此抗血清鉴定表达产物。结果 EGFR-LSL在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,抗Hi
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