探讨外源性一氧化碳（CO）对脓毒症时血小板异常释放的抑制作用及其可能分子机制。
方法采集健康成年志愿者空腹肘静脉血，采用差速离心法获得富含血小板血浆（PRP），按随机数字表法分为正常对照组、脂多糖（LPS）组（10 mg/L LPS刺激）、无活性外源性一氧化碳释放分子2（iCORM-2）组（10 mg/L LPS + 50 μmol/L iCORM-2干预）、外源性一氧化碳释放分子2（CORM-2）10 μmol/L和50 μmol/L组（10 mg/L LPS + CORM-2 10 μmol/L或50 μmol/L干预）。30 min后用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测上清液中血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）和基质金属蛋白酶2（MMP-2）水平；化学荧光素法检测血小板三磷酸腺苷（ATP）水平；流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白P-选择素水平；蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测血小板表面信号分子Toll样受体4（TLR4）表达及关键信号分子蛋白激酶Cθ亚型（PKCθ）和突触融合蛋白结合蛋白1（STXBP-1）磷酸化；免疫共沉淀法检测STXBP-1介导的可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子黏附受体（SNAREs）复合体突触融合蛋白2-突触相关蛋白23-囊泡相关膜蛋白8（STX2-SNAP23-VAMP8）的形成。
结果① 与正常对照组相比，LPS刺激后血小板释放PDGF-BB、MMP-2和ATP均显著增加，血小板表面P-选择素表达明显上调〔PDGF-BB（μg/L）：127.53±1.78比94.35±5.84，MMP-2（ng/L）：51.87±9.20比35.83±3.17，ATP（μmol/L）：1.288±0.056比0.975±0.010，P-选择素：（3.93±0.19）%比（0.44±0.10）%，均P<0.05〕；10 μmol/L和50 μmol/L CORM-2干预均能有效抑制LPS诱导血小板释放PDGF-BB、MMP-2、ATP和P-选择素的高表达，并呈剂量依赖性〔PDGF-BB（μg/L）：114.68±1.35、97.08±6.14比127.53±1.78，MMP-2（ng/L）：32.67±8.00、24.63±1.63比51.87±9.20，ATP（μmol/L）：0.999±0.015、0.965±0.008比1.288±0.056，P-选择素：（1.95±0.27）%、（0.94±0.11）%比（3.93±0.19）%，均P<0.05〕。② 与正常对照组相比，LPS刺激后血小板TLR4表达以及PKCθ和STXBP-1的磷酸化水平均显著增加〔TLR4（灰度值）：1.21±0.38比0.67±0.06，p-PKCθ（灰度值）：1.36±0.20比0.44±0.03，p-STXBP-1（灰度值）：1.13±0.06比0.59±0.04，均P<0.05〕；10 μmol/L和50 μmol/L CORM-2干预均能有效抑制血小板各指标，并呈剂量依赖性〔TLR4（灰度值）：0.76±0.05、0.65±0.04比1.21±0.38，p-PKCθ（灰度值）：0.71±0.07、0.47±0.10比1.36±0.20，p-STXBP-1（灰度值）：0.56±0.02、0.48±0.01比1.13±0.06，均P<0.05〕。③ 与正常对照组相比，LPS刺激后血小板中与STXBP-1耦联的STX2、SNAP23和VAMP8均显著增加〔STX2（灰度值）：1.35±0.06比0.57±0.04，SNAP23（灰度值）：0.97±0.04比0.30±0.12，VAMP8（灰度值）：1.37±0.12比0.77±0.10，均P<0.05〕；10 μmol/L和50 μmol/L CORM-2干预均能够有效抑制血小板SNAREs复合体的形成，并呈剂量依赖性〔STX2（灰度值）：0.77±0.02、0.39±0.03比1.35±0.06），SNAP23（灰度值）：0.41±0.03、0.22±0.08比0.97±0.04，VAMP8（灰度值）：0.85±0.07、0.66±0.07比1.37±0.12，均P<0.05〕。iCORM-2组与LPS组上述各指标比较差异均无统计学意义。
结论脓毒症时血小板释放功能异常活跃，CORM-2干预能有效抑制血小板的过度释放，其机制可能与TLR4/PKCθ/STXBP-1信号途径介导的SNAREs复合体形成有关。