【摘 要】
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目的 将SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术应用于布鲁氏菌的快速检测,为布鲁氏菌病(布病)的早期发现提供新的检测手段.方法 将收集的布病急性期患者全血2份,慢性期患者全血8份和
【机 构】
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青海省地方病预防控制所鼠疫预防控制科/布鲁氏菌病预防控制科/地方病预防控制科,青海西宁810021
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目的 将SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术应用于布鲁氏菌的快速检测,为布鲁氏菌病(布病)的早期发现提供新的检测手段.方法 将收集的布病急性期患者全血2份,慢性期患者全血8份和羊全血12份进行细菌分离培养,筛选疑似布鲁氏菌进行涂片镜检、噬菌体裂解试验,同时提取核酸,制备模板,利用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术进行布鲁氏菌检测.结果 共分离出4株疑似布鲁氏菌,其形态及染色特征与革兰阴性小杆菌相同.1、2、3号菌株噬菌体裂解试验BK2裂解,Tb不裂解,确定为羊种布鲁氏菌,4号噬菌体裂解试验阴性.除4号待测菌株和阴性对照EV76外,其他菌株的荧光定量PCR的熔解曲线在88 ℃左右出现特异性的吸收峰,证实是布鲁氏菌.结论 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术检测布鲁氏菌用时短,特异性强,重复性好,在布病的筛查和布鲁氏菌的快速检测中具有较好的推广应用价值.
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