凋亡素VP3蛋白的原核表达及纯化

• 作 者: 邓守恒 柯贤柱 石小燕 蔡召忠 杨敬宁 黄永章 陈萍
• 机 构: 湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心,武汉市中心医院,湖北医药学院免疫教研室
• 出 处: 山东医药
• 发表日期: 2012年17期
• 关键词: 凋亡素 VP3 分离 提纯

目的构建凋亡素VP3蛋白的原核表达质粒，并进行诱导表达和蛋白纯化。方法采用PCR法自PGEX-6P．1／TAT．VP3质粒中扩增VP3基因，运用靶向克隆酶将VP3基因插入线性pETl5b，构建重组表达质粒pET．15b．VP3；经测序证实构建成功后转化E．coliRosetta，表达凋亡素VP3蛋白；经Ni-NTA树脂亲和层析，对纯化产物进行SDS．PAGE、Westernblotting分析鉴定。结果成功构建凋亡素VP3蛋白原核表达质粒，表达并纯化了分子量为13．6kD的凋亡素VP3蛋白。结论凋亡素VP