【摘 要】
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目的:建立从干血点中提取并检测睾酮酯类兴奋剂的方法,以解决辨别外源性睾酮的难题.方法:取20μL的干血点样品,经过水复溶后,对蛋白进行沉淀,利用有机溶剂进行液液萃取,使用甲氧胺试剂进行衍生化,用高分辨液相色谱质谱进行检测分析.结果:本方法对醋酸睾酮酯、丙酸睾酮酯、苯甲酸睾酮酯、苯丙酸睾酮酯、环戊丙酸睾酮酯、庚酸睾酮酯、癸酸睾酮酯、十一酸睾酮酯的检测限为0.1~0.3 ng/mL,提取回收率为50.0%~86.0%.采用液相色谱实现了8种睾酮酯的肟化产物的同分异构体的基线分离,并对E和Z型异构体进行了结构推
【机 构】
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国家体育总局反兴奋剂中心兴奋剂检测实验室,北京100029
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目的:建立从干血点中提取并检测睾酮酯类兴奋剂的方法,以解决辨别外源性睾酮的难题.方法:取20μL的干血点样品,经过水复溶后,对蛋白进行沉淀,利用有机溶剂进行液液萃取,使用甲氧胺试剂进行衍生化,用高分辨液相色谱质谱进行检测分析.结果:本方法对醋酸睾酮酯、丙酸睾酮酯、苯甲酸睾酮酯、苯丙酸睾酮酯、环戊丙酸睾酮酯、庚酸睾酮酯、癸酸睾酮酯、十一酸睾酮酯的检测限为0.1~0.3 ng/mL,提取回收率为50.0%~86.0%.采用液相色谱实现了8种睾酮酯的肟化产物的同分异构体的基线分离,并对E和Z型异构体进行了结构推测,满足世界反兴奋剂机构(World Anti-Doping Agency,WADA)的相关要求.人体试验中,对6名健康成年男性志愿者一次性肌肉注射0.25 g十一酸睾酮后,采用本方法可以检测到停药后7~14天的睾酮酯.结论:新方法具有快速、灵敏、微创的特点,是一种直接检测睾酮酯的方法,已通过ISO-17025质量体系认证,即将作为睾酮类兴奋剂药物的有效检测手段,在北京2022年冬奥会、冬残奥会的反兴奋剂检测中使用.
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