阻断Notch信号通路抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖的实验研究

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:study1129
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目的探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖和凋亡的影响及其机制。方法体外培养骨肉瘤MG-63细胞株;MTT法检测不同浓度DAPT(1.0、5.0、10.0μmol/L)对骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察不同浓度DAPT对骨肉瘤MG-63细胞形态的影响;流式细胞术结合AnnexinⅤ-FITC/PI双染分析不同浓度DAPT对骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响;RT-PCR法检测骨肉瘤MG-63细胞Notch1、HES1基因表达。结果不同浓度的DAPT作用于骨肉瘤MG-63细胞后,细胞增殖水平明显下降(P<0.05),1.0μmol/L DAPT即抑制细胞生长,随着DAPT浓度增加抑制效果明显增强,呈显著的浓度依赖关系,且随着DAPT作用时间延长,抑制效果也明显增强。细胞凋亡结果分析表明,DAPT能浓度依赖性地诱导骨肉瘤MG-63细胞发生凋亡。RT-PCR显示随着DAPT量的增加,Notch l、HES l mRNA的表达逐渐下降(均P<0.05)。结论 DAPT对骨肉瘤MG-63细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用可能与下调MG-63细胞中Notch l、HES 1mRNA的表达有关。
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