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摘要：要让百姓吃上放心的蔬菜，对蔬菜中农药残留量检验尤为重要，有机磷含量检测是一个十分重要的环节，客观公正检测市场中流通蔬菜的有机磷含量，是质量检验人员的职责和义务，本文从专业角度介绍该指标检测的理论依据和实施的具体方法措施等。
关键词：蔬菜 农药残留 有机磷
根据调查报告中提到的有关农副产品的农药残留问题，它不仅关系到消费者的身体健康，也关系到食品贸易的发展，因此已成为政府和百姓普遍关心的热点问题之一，而对老百姓日常生活每天都要购买和食用的蔬菜尤显重要。在栽培过程中滥用农药的现象也非常普遍，由蔬菜引起的食物中毒也频频发生。本设计方案从专业角度介绍蔬菜农药残留中有机磷含量的检测。
1 农药残留检测方法的种类及特点
农药残留含量的检测方法分为两大类，即生物测定方法和理化分析方法。生物测定方法，如活体生物测定法（利用细菌或敏感家蝇）、免疫生测定法（酶联免疫法）、生化生物測定法（酶抑制法）等，其优点是检测方便、快速、经济，缺点是仅以定性分析为主，很难判断各组分的准确含量。理化分析方法即仪器分析法，是采用专业大型仪器对农药残留含量进行精确的定量分析，灵敏度高，可靠性强。为了定量准确测定，本文主要以理化分析为主，介绍有机磷含量检测的方案。
2 检测的依据（有机磷的特点和仪器分析原理）
农药残留中有机磷的种类很多，如敌敌畏、乐果、毒死蜱、久效磷、甲基对硫磷、喹硫磷等。有机磷是含有C-P键或C-O-P、C-S-P、C-N-P键的有机化合物，大部分不溶于水，而溶于有机溶剂，在中性和酸性条件下稳定，不易水解，在碱性条件下易水解而失效。
气质联谱是将气相色谱仪和质谱仪联用的一种现代化大型专业检测仪器。气相色谱仪中利用物质在流动相与固定相中分配系数的不同，当两相作相对运动时，被测样品组分在两相之间进行反复多次分配，诸组分的分配系数纵然只有微小差异，随着流动相（气体）的移动也可以有差距，最后被测样品组分可得到分离，并被测定。但对组分定性时，若仅依据保留值，则难以对复杂未知物作出最终判断。在质谱仪中，有机分子在高真空下，受电子流轰击或强电场作用，离解成各具特征质量的碎片离子和分子离子。这些带正电荷的离子，具有不同的质荷比m/z（即相对离子质量与电荷之比），在磁场中它们被分离。收集、记录这些离子的信号及其强度，便可得到各组分的质谱图。根据图中质谱峰出现的位置进行定性分析，根据质谱峰的强度进行定量分析。
蔬菜试样中有机磷农药经提取、分离、净化后，在富氢焰上燃烧，以氢磷氧碎片的形式，放射出波长526nm的特性光，这种特性光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高相比，计算出试样相当的含量。
3 样本的采集要求
在评价分析结果的可靠性时，样本的规范采集是保证质量的一个重要方面。采样的原则是：所采集的样本必须具有代表性，否则，再先进的仪器设备，再仔细地操作，再好的重复性，结果也将毫无价值。采集的方法有：对角线法、S型法、Z型法、棋盘法、五点法等。采集的数量：3kg（不少于5个点）。采集的样本需放入无污染的容器内，如聚乙烯塑料袋（盒），并写好标签，标签需放置于包装内外各一个，写明编号、取样日期等。包装好的样品应立即送到实验室，运输途中避免样本受损、污染。
4 样本的预处理
采集的样本送到实验室，对易挥发的农药要立即进行分析。如在近日内进行分析的样本，放在0～-5℃的冰箱内保存，如近期不能分析的须将样本放在-20℃的冰箱内保存。植物样本贮存时，细胞已冻坏，从冰箱取出后要立即分析。
5 样本的前处理：提取、浓缩与净化
样品的前处理在色谱分析过程中是一个既耗时又极易引进误差的步骤，样品前处理的好坏直接影响色谱分析的最终结果。因此要加强前处理，尽量去除基体；对相互干涉的目标化合物可采用预分离方法，分成几组再分别进行测定等。样品前处理的方法有好多种，使用时主要根据整个样品和欲测组分的物理化学性质以及所要使用的色谱对样品的要求，同时也要考虑处理所需的时间和费用。下面介绍的是有机磷含量测定中样品前处理较为常用的两种方法：
5.1 将待测样品用四分法缩分至100g左右，细切均匀后，称取50.0g放入搅拌杯内（不锈钢或玻璃制），加入50ml水和100ml丙酮，用搅拌机细碎3分钟，匀浆液经铺有硅藻土的滤纸减压抽滤，取滤液100ml移至500ml分液漏斗中。向滤液中加入10～15g氯化钠，使溶液处于饱和状态，猛烈振摇2～3分钟，静置10分钟，使丙酮与水相分层，将水相放入250ml分液漏斗中，加50ml二氯甲烷振摇2分钟，再静置分层，放去下层水相，将二氯甲烷提取液与丙酮提取液合并，经装有20～30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水，滤入250ml圆底烧瓶中，再以约40ml二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠，并入烧瓶中，用旋转蒸发器（蒸发水浴温度为40℃）浓缩至约2ml，加二氯甲烷定量至5ml。
5.2 称取细切均匀的样品50.0g放入捣碎器中，加入100ml乙腈-乙醇混合液（95+5，现配）捣碎5分钟，加入15g氯化钠，继续捣碎5分钟。转移40ml上层有机相于200ml离心瓶中，加入15g无水硫酸钠充分振荡，高速离心5分钟。定量移取30ml至200ml浓缩管中，通氮气在35℃下浓缩至约5ml。在Envi-Carb固相萃取柱中加约2cm无水硫酸钠，用5ml甲苯淋洗。1500mg SAX（阳离子）固相萃取柱和PSA（阴离子）固相萃取柱分别用5ml甲苯淋洗。将75ml淋洗液储备管、Envi-Carb固相萃取柱、SAX固相萃取柱和PSA固相萃取柱从上至下，按顺序相连，用5ml乙腈-甲苯（3+1，现配）预淋。将浓缩液转移到储备管中，通氮气将样品推入Envi-Carb柱中。每次用10ml乙腈-甲苯液淋洗，共淋洗4次，收集淋洗液于200ml浓缩瓶中并浓缩至小于1ml。加入约10ml丙酮再浓缩至2ml。
关键词：蔬菜 农药残留 有机磷
根据调查报告中提到的有关农副产品的农药残留问题，它不仅关系到消费者的身体健康，也关系到食品贸易的发展，因此已成为政府和百姓普遍关心的热点问题之一，而对老百姓日常生活每天都要购买和食用的蔬菜尤显重要。在栽培过程中滥用农药的现象也非常普遍，由蔬菜引起的食物中毒也频频发生。本设计方案从专业角度介绍蔬菜农药残留中有机磷含量的检测。
1 农药残留检测方法的种类及特点
农药残留含量的检测方法分为两大类，即生物测定方法和理化分析方法。生物测定方法，如活体生物测定法（利用细菌或敏感家蝇）、免疫生测定法（酶联免疫法）、生化生物測定法（酶抑制法）等，其优点是检测方便、快速、经济，缺点是仅以定性分析为主，很难判断各组分的准确含量。理化分析方法即仪器分析法，是采用专业大型仪器对农药残留含量进行精确的定量分析，灵敏度高，可靠性强。为了定量准确测定，本文主要以理化分析为主，介绍有机磷含量检测的方案。
2 检测的依据（有机磷的特点和仪器分析原理）
农药残留中有机磷的种类很多，如敌敌畏、乐果、毒死蜱、久效磷、甲基对硫磷、喹硫磷等。有机磷是含有C-P键或C-O-P、C-S-P、C-N-P键的有机化合物，大部分不溶于水，而溶于有机溶剂，在中性和酸性条件下稳定，不易水解，在碱性条件下易水解而失效。
气质联谱是将气相色谱仪和质谱仪联用的一种现代化大型专业检测仪器。气相色谱仪中利用物质在流动相与固定相中分配系数的不同，当两相作相对运动时，被测样品组分在两相之间进行反复多次分配，诸组分的分配系数纵然只有微小差异，随着流动相（气体）的移动也可以有差距，最后被测样品组分可得到分离，并被测定。但对组分定性时，若仅依据保留值，则难以对复杂未知物作出最终判断。在质谱仪中，有机分子在高真空下，受电子流轰击或强电场作用，离解成各具特征质量的碎片离子和分子离子。这些带正电荷的离子，具有不同的质荷比m/z（即相对离子质量与电荷之比），在磁场中它们被分离。收集、记录这些离子的信号及其强度，便可得到各组分的质谱图。根据图中质谱峰出现的位置进行定性分析，根据质谱峰的强度进行定量分析。
蔬菜试样中有机磷农药经提取、分离、净化后，在富氢焰上燃烧，以氢磷氧碎片的形式，放射出波长526nm的特性光，这种特性光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高相比，计算出试样相当的含量。
3 样本的采集要求
在评价分析结果的可靠性时，样本的规范采集是保证质量的一个重要方面。采样的原则是：所采集的样本必须具有代表性，否则，再先进的仪器设备，再仔细地操作，再好的重复性，结果也将毫无价值。采集的方法有：对角线法、S型法、Z型法、棋盘法、五点法等。采集的数量：3kg（不少于5个点）。采集的样本需放入无污染的容器内，如聚乙烯塑料袋（盒），并写好标签，标签需放置于包装内外各一个，写明编号、取样日期等。包装好的样品应立即送到实验室，运输途中避免样本受损、污染。
4 样本的预处理
采集的样本送到实验室，对易挥发的农药要立即进行分析。如在近日内进行分析的样本，放在0～-5℃的冰箱内保存，如近期不能分析的须将样本放在-20℃的冰箱内保存。植物样本贮存时，细胞已冻坏，从冰箱取出后要立即分析。
5 样本的前处理：提取、浓缩与净化
样品的前处理在色谱分析过程中是一个既耗时又极易引进误差的步骤，样品前处理的好坏直接影响色谱分析的最终结果。因此要加强前处理，尽量去除基体；对相互干涉的目标化合物可采用预分离方法，分成几组再分别进行测定等。样品前处理的方法有好多种，使用时主要根据整个样品和欲测组分的物理化学性质以及所要使用的色谱对样品的要求，同时也要考虑处理所需的时间和费用。下面介绍的是有机磷含量测定中样品前处理较为常用的两种方法：
5.1 将待测样品用四分法缩分至100g左右，细切均匀后，称取50.0g放入搅拌杯内（不锈钢或玻璃制），加入50ml水和100ml丙酮，用搅拌机细碎3分钟，匀浆液经铺有硅藻土的滤纸减压抽滤，取滤液100ml移至500ml分液漏斗中。向滤液中加入10～15g氯化钠，使溶液处于饱和状态，猛烈振摇2～3分钟，静置10分钟，使丙酮与水相分层，将水相放入250ml分液漏斗中，加50ml二氯甲烷振摇2分钟，再静置分层，放去下层水相，将二氯甲烷提取液与丙酮提取液合并，经装有20～30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水，滤入250ml圆底烧瓶中，再以约40ml二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠，并入烧瓶中，用旋转蒸发器（蒸发水浴温度为40℃）浓缩至约2ml，加二氯甲烷定量至5ml。
5.2 称取细切均匀的样品50.0g放入捣碎器中，加入100ml乙腈-乙醇混合液（95+5，现配）捣碎5分钟，加入15g氯化钠，继续捣碎5分钟。转移40ml上层有机相于200ml离心瓶中，加入15g无水硫酸钠充分振荡，高速离心5分钟。定量移取30ml至200ml浓缩管中，通氮气在35℃下浓缩至约5ml。在Envi-Carb固相萃取柱中加约2cm无水硫酸钠，用5ml甲苯淋洗。1500mg SAX（阳离子）固相萃取柱和PSA（阴离子）固相萃取柱分别用5ml甲苯淋洗。将75ml淋洗液储备管、Envi-Carb固相萃取柱、SAX固相萃取柱和PSA固相萃取柱从上至下，按顺序相连，用5ml乙腈-甲苯（3+1，现配）预淋。将浓缩液转移到储备管中，通氮气将样品推入Envi-Carb柱中。每次用10ml乙腈-甲苯液淋洗，共淋洗4次，收集淋洗液于200ml浓缩瓶中并浓缩至小于1ml。加入约10ml丙酮再浓缩至2ml。