【摘 要】
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目的构建小鼠内皮抑制素（endostatin）真核表达质粒，进行分泌性表达，研究其体外生物学活性，以进一步用于肿瘤的基因治疗。方法人工合成小鼠Igκ轻链信号肽序列，RT-PCR获得小鼠内皮抑
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(No.2002CB513100)
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目的构建小鼠内皮抑制素（endostatin）真核表达质粒，进行分泌性表达，研究其体外生物学活性，以进一步用于肿瘤的基因治疗。方法人工合成小鼠Igκ轻链信号肽序列，RT-PCR获得小鼠内皮抑制素编码序列，一起克隆入真核表达载体pcDNA3．1中，对其进行酶切鉴定和序列分析。重组质粒经脂质体介导转染受体细胞BHK-21，ELISA检测细胞培养上清中内皮抑制素的含量。用此上清作用于经bFGF刺激的ECV304内皮细胞和HepG2肝癌细胞，MTT法检测细胞的增殖。结果经酶切鉴定及DNA测序分析，Igκ信号肽序列
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