重组人干细胞因子理化性质和生物活性分析

来源 :军事医学科学院院刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:simetl1235
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
干细胞因子 (stemcellfactor ,SCF)是一种对造血细胞有重要作用的因子 ,在自体外周血造血前体细胞移植、肿瘤放化疗的辅助治疗、贫血和其他血液病的治疗方面有良好的应用前景。目的 :分析本所制备的rhSCF的理化性质和生物活性。方法 :用反相高效液相色谱、质谱、凝胶高效液相色谱等方法分别测定了制品的纯度、分子量、氨基酸组成、紫外光谱等 ,并用TF 1细胞测定了制品的生物活性。结论 :制品分子量为 18558,与天然hSCF的差异小于 0 .2 % ,产物以非共价二聚体形式存在。氨基酸组成与天然hSCF相同 ,紫外光谱为典型的蛋白光谱 ,在 2 77nm有特征吸收 ,比活为 0 .95× 10 6U /mg ,与国外参考品相似。上述结果初步说明制备的rhSCF理化性质与天然hSCF一致 ,生物活性良好 ,有望进一步开发用于临床。 Stem cell factor (SCF) is a factor that plays an important role in hematopoietic cells. It has good application prospect in autologous peripheral blood hematopoietic cell transplantation, adjuvant chemotherapy of tumor radiotherapy and chemotherapy, anemia and other hematological diseases. Objective: To analyze the physicochemical properties and biological activity of rhSCF. Methods: Purity, molecular weight, amino acid composition and UV spectrum of the product were determined by RP-HPLC, MS and gel-HPLC respectively. The biological activity of the product was measured by TF1 cells. Conclusion: The molecular weight of the product is 18558, which is less than 0.2% of that of natural hSCF. The product exists as non-covalent dimer. The amino acid composition is the same as that of natural hSCF. The UV spectrum is a typical protein spectrum with a characteristic absorption at 2 77 nm. The specific activity is 0.95 × 10 6 U / mg, which is similar to foreign references. The above results preliminary shows that the prepared rhSCF physical and chemical properties consistent with the natural hSCF, good biological activity, is expected to be further developed for clinical use.
其他文献
循环逆转录(circulatory reverse transcription,CRT)是线性增长逆转录cDNA产量的一种新技术.为了将该技术用于检测HCV RNA,通过改变CRT的循环次数,结合竞争PCR,作出标准曲线
目的研究人源性细胞在电磁脉冲(EMP)及电离辐射作用后的生物效应. 方法用电磁脉冲发生器和60Co-γ线分别照射人肠上皮细胞,以四唑盐(MTT)比色法检测受照细胞的存活程度. 结果
旋扭山绿豆是一种优良的豆科牧草,在遮荫条件下能正常生长,阳生和阴生条件下植株的粗蛋白含量均在20%以上.两种生境下植株的粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、无氮浸出物及灰分含量无
对烟曲霉rRNA基因内转录间区(ITS区)进行了克隆测序,并将之与其他几种常见曲霉的相应序列进行了比较.发现3株烟曲霉的ITSⅠ区完全相同,而其中1株烟曲霉的ITSⅡ区与一条已知相
氧浓度对固定化黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)合成过氧化物酶有较大的影响.限碳条件下培养黄孢原毛平革菌,生长阶段氧浓度对合成木质素过氧化物酶的影响不明
酿酒酵母Cu2+抗株YND21经含一定浓度的氯化铜培养基诱导培养后,收集菌体,破碎细胞,离心后Sephadex G-50和DEAE-cellulose柱层析分离可获得三种铜结合蛋白DE-1,DE-2,DE-3.DE-1
利用PCR扩增得到粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、白细胞介素 3(IL 3)完整基因片段 ,将其分别克隆至pGEM T ,构建成GM CSF/IL 3融合蛋白基因 ,DNA序列与设计预期一致
A novel α-amylase gene was amplified from Sulfolobus shibatae by using PCR technique.The amplified 1.7kb DNA fragment was inserted into an expression vector pB
目的探讨自杀基因疗法对神经母细胞瘤的作用,为临床应用打下基础. 方法利用含胸苷激酶基因(tk)与潮霉素磷酸转移酶基因(hy)的融合基因的真核表达载体及仅含hy的空载体,以脂质
动物细胞中,高尔基体往往位于微管组织中心(MTOC)附近,它们的位置部分地被58K蛋白所决定.通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹方法,我们发现川百合花粉与花粉管内存在类高