【摘 要】
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目的构建蛋白酶体激活因子PA28γ过表达的口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞稳转株,并验证其过表达PA28γ的效率。方法首先采用聚合酶链反应(PCR)克隆PA28γ基因至pLOV.CMV.cherry.2A
【基金项目】
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国家重点研发计划重点专科课题(2017YFC0840100,2017YFC0840107);国家自然科学基金(81472533,81672675,281771081)~~
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目的构建蛋白酶体激活因子PA28γ过表达的口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞稳转株,并验证其过表达PA28γ的效率。方法首先采用聚合酶链反应(PCR)克隆PA28γ基因至pLOV.CMV.cherry.2A.EF1a.PuroR慢病毒载体中,采用PCR和DNA测序比对分析进行鉴定;其次采用293T细胞包装病毒;然后采用病毒感染OSCC细胞构建PA28γ稳定过表达细胞株。最后利用免疫印迹技术检测OSCC细胞稳转株中PA28γ表达的水平。结果DNA测序结果显示成功构建PA28γ过表达慢病毒载体构建;荧光结果显示,
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