在宿主细胞内仅有部分慢病毒载体发生了功能性整合

• 作 者: 张丽萍 高越 檀硕 张敬之
• 机 构: 上海交通大学附属儿童医院,卫生部医学胚胎与分子生物学重点实验室、上海市胚胎与生殖工程重点实验室
• 出 处: 医学分子生物学杂志
• 发表日期: 2015年4期
• 关键词: 慢病毒载体 基因治疗 转染 整合 lentiviral vector gene theropy infection integration
• 基金项目: 资助项目：国家自然科学基金（No.81271690）,上海市糖尿病重点实验室开放课题（No.SHKLD-K-1201）

目的研究慢病毒在感染细胞后，是否全部整合入染色体。方法用慢病毒载体的假病毒感染293T细胞后．抽提培养2d和10d的细胞基因组DNA。通过定量PCR检测细胞基因组中LTR拷贝数，计算出整合率。分别取病毒感染3d和11d的细胞，离心重悬后取部分细胞放在荧光显微镜下拍照，在蛋白水平上验证此结论。结果①慢病毒载体在宿主细胞基因组内的平均整合率（47±16）％（n=10）；②细胞感染慢病毒后3d和11d的GFP照片也证实了慢病毒在宿主细胞基因组内部分整合。结论慢病毒载体的假病毒感染293T细胞后，仅有部