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目的
探讨磁刺激诱导星形胶质细胞迁移的机制及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对星形胶质细胞迁移的影响。
方法取新生2~3 d SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞,用细胞免疫荧光法检测细胞纯度;将细胞分为磁刺激组和对照组,磁刺激组给予磁刺激,对照组在相同环境下,不给予磁刺激。将细胞分为实验组和控制组,实验组用10 μmol/ml U0126抑制剂预刺激30 min,控制组不加入U0126抑制剂,以探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2)与HMGB1的关系;将细胞分为siRNA转染组和HMGB1-siRNA转染组,SiRNA组给予HMGB1 siRNA处理,以探讨HMGB1对细胞迁移能力的影响。用Western blot检测磁刺激对HMGB1和ERK1/2的影响,用划痕实验检测磁刺激对星形胶质细胞迁移能力的影响。
结果10 Hz磁刺激可促进ERK磷酸化,增强星形胶质细胞的迁移能力,并可增加HMGB1的表达水平;用U0126试剂处理后,HMGB1的表达量明显下降;HMGB1 siRNA转染后HMGB1表达量明显下降,且星形胶质细胞的迁移能力显著下降。
结论星形胶质细胞在磁刺激作用下,通过激活ERK通道,促进ERK磷酸化,增加下游HMGB1的表达水平,且HMGB1以自分泌的形式促进自身迁移。