【摘 要】
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目的建立一种稳定的屋尘螨点刺液生物活性测定方法,以替代现用的放射性吸附抑制测定方法(radio allergosorbent test,RAST)。方法建立定量ELISA竞争抑制法,对屋尘螨点刺液进
【基金项目】
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国家药典委员会药品医疗器械审评审批制度改革药品标准研究课题(ZG2016-3-02);中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(2018PT34046)
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目的建立一种稳定的屋尘螨点刺液生物活性测定方法,以替代现用的放射性吸附抑制测定方法(radio allergosorbent test,RAST)。方法建立定量ELISA竞争抑制法,对屋尘螨点刺液进行生物活性测定,并对该法进行精密性、准确性、适用性验证,确定线性测定范围。应用RAST和定量ELISA竞争抑制法平行测定3批屋尘螨点刺液生物活性,对结果进行比较。结果定量ELISA竞争抑制法测定屋尘螨点刺液制品生物活性,其最佳测定范围为0.052~0.125 HEP/m L;高、中、低3个浓度的日内精密性≤10.3%,日间精密性≤11%,回收率为87%~106%,表明该方法具有较好的精密性;低、中、高3个加标样本的回收率均在73.18%~99.02%之间,表明该方法具有较好的准确性;3批屋尘螨点刺液生物活性最佳测定范围的稀释度为1/48~1/192,所有测定样本的相对活性在80%~110%范围内,表明该方法适用于屋尘螨点刺液生物活性检测。两种方法测定屋尘螨点刺液生物活性,结果差异无统计学意义(P>0.05),且均符合质量标准规定。结论定量ELISA竞争抑制法测定屋尘螨点刺液的生物学活性,重复性好,准确性高,操作简便,可作为现用生物活性测定RAST法的替代方法。
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