小麦农杆菌介导转基因植株的稳定获得和检测

• 作 者: 叶兴国 徐惠君 杜丽璞 Shirley Sato Tom C
• 机 构: 中国农业科学院作物育种栽培研究所,美国内布拉斯加大学生物技术中心
• 出 处: 中国农业科学
• 发表日期: 2001年5期
• 关键词: 小麦 农杆菌 转基因植株 单拷贝整合 稳定转化 Wheat Agrobacterium tumefaciens Transgenic plants Sin
• 基金项目: 引进国际先进农业科技计划(948计划)

以预培养4d的小麦幼胚愈伤组织为受体,LB培养基上激活培养3d或AB培养基上激活培养4d,并在WCC培养基中重悬的C58c1农杆菌菌系为供体,将含有目的基因、标记基因的pPTN249、pPTN254、pPTN270、pSIS-GFP等重组DNA质粒转入了小麦,经在含10～50mg/Lgeneticin(G418)、50mg/Lcefotaxime、50mg/Lvancomycin、50mg/L ticillicin选择培养基上多次选择,移栽前利用nptⅡ EISA检测,移栽后利用叶片离体退绿、PCR和So