Hpd基因修饰制备高酪氨酸血症Ⅲ型巴马小型猪模型

• 作 者: 顾鹏 陈傍柱 徐涛 刘闻 邓俊成 徐名衬 袁进 陈恩生 顾为望
• 机 构: 南方医科大学比较医学研究所暨实验动物中心,广州 510515东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司,广东 东莞 523808;南方医科大学比较医学研究所暨实验动物中心,广州,510515;东莞松山湖明珠实
• 出 处: 中国比较医学杂志
• 发表日期: 2019年5期
• 关键词: 4-羟基苯丙酮酸氧化酶 CRISPR/Cas9 高酪氨酸血症Ⅲ型 巴马小型猪

目的 利用CRISPR/Cas9技术敲除巴马小型猪4-羟基苯丙酮酸氧化酶(4-OH phenylpyruvate dioxygenase,4HPPD/HPD)制备高酪氨酸血症III型巴马小型猪模型.方法 分别从质粒pGL3-U6-gRNA-PGK-puromycin和pST1374-NLS-flag-linker-Cas9中通过PCR扩增sgRNA-Hpd和Cas9体外转录用模板,接着体外转录出Cas9 mRNA和sgRNA-Hpd,最后将Cas9 mRNA和sgRNA-Hpd共注射入巴马小型猪受精卵的胞质内,以制备Hpd基因敲除巴马小型猪.结果 胞质内共注射后,共移植20枚受精卵至2只代孕母猪.获得子代Hpd基因敲除巴马小型猪共4只.结论 本研究成功制备了高酪氨酸血症III型巴马小型猪模型,将为研究酪氨酸代谢通路提供更好的模型.