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目的：比较优化人血清蛋白双向电泳（2-DE）分离技术,提高2-DE对血清蛋白的分辨能力。方法：收集健康人群标本,分别进行多次双向电泳,比较高丰度蛋白的去除前后及传统的考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色两种不同的染色方法等因素对双向电泳图谱质量的影响。结果：考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色相比,血清2-DE图谱检测到平均蛋白质点数分别是（324±25）（n=3）和（785±30）（n=3）;去除高丰度蛋白前后比较,未做处理的血清、去除蛋白和IgG血清的2-DE图谱检