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摘 要：本文使用高效液相色谱法来进行颠茄磺苄啶片溶出度的测定。所应用的流动相PH值达到了6.0，流速达到了1.2ml/min，通常实验测定溶液波长达到240nm时具有非常好的吸收率，当柱温达到30℃时，具有非常好的效果。测定结果表明，当磺胺甲噁唑范围高于40μg/ml，但是小于400μg/ml时，吸收度线性关系处于良好关系状态，平均回收率达到了98.7%，当磺胺甲噁唑范围高于8μg/ml，但是小于80μg/ml时，吸收度线性关系处于良好关系状态，平均回收率状态达到了99.1%。因此完全可以证明，使用高效液相色谱法对颠茄磺苄啶片溶出度进行测定不仅方法灵敏，而且结果真实可靠，具有非常好的重现性，可以进一步推广使用。
关键词：高效液相色谱法；颠茄磺苄啶片；溶出度；测定方法；
颠茄磺苄啶片是一种比较常见的处方抗菌药，具有抑菌以及杀菌的功能。现如今，我国药典中已经对该药物的崩解时限进行了明确的规定。本品主要有三种成分构成，分别为磺胺甲噁唑、甲氧苄啶、颠茄流浸膏。这三种成分含量所占比重最高的是磺胺甲噁唑，最低的是颠茄流浸膏，甲氧苄啶介于中间位置。高效液相色谱法应用领域非常广泛，通常是用来测定药品含量，此种测定方法，具有非常多的优势，比如速度快，最长不超过1h，最快5min就能够完成测定；灵敏度非常高；应用范围非常广，绝不大部分有机化合物都可以使用此种方法进行测定。另外，高效液相色谱法所使用的设备不容易发生损坏，可以长期重复使用，应用的样品也不容易破损，还非常容易回收。本文主要是利用高效液相色谱法进行颠茄磺苄啶片溶出度的测定，以便能够找到控制颠茄磺苄啶片质量的新方法。
一、仪器与试药
1、仪器
高效液相色谱仪（美国Agligent公司1100系列，包括Agli-gent四元泵，自动进样器，柱温箱，色谱工作站）；D-800LS型智能溶出试验仪（天津大学仪器厂）。
2、试药
磺胺甲噁唑与甲氧苄啶对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100025-199503，100031-200304）；颠茄磺苄啶片（6批，其中，哈药集团制药六厂2批，批号为070153，060711；新乡同心药业2批，批号为070502，070404；江西汇仁药业2批，批号为0704025，0704023）；乙睛（色谱纯），水（纯化水）。
二、方法与结果
1、色譜条件
色谱柱为XDB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-水-三乙胺（20∶80∶0.2，V/V/V，用冰醋酸调节pH值到6.0），流速为1.2 ml/min，检测波长为240 nm，柱温30℃。理论板数大于5 000，相邻峰分离度大于5.0。
2、对照品溶液的制备
取磺胺甲噁唑对照品40 mg，精密称定，置100 ml容量瓶中，取甲氧苄啶对照品8 mg，精密称定，置同一容量瓶中，加0.1 mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，制成含磺胺甲噁唑400 μg/ml和含甲氧苄啶80 μg/ml的对照品溶液。
3、溶出方法的选择
取本品，照溶出度测定法（转篮法）[4]测定，以0.1 mol/L的盐酸溶液为溶剂，转速分别为50、100、150 r/min，依法操作，分别在5、15、30、45 min时取样10 ml，并同时补充相同温度、相同体积的溶剂，滤过，精密量取续滤液10 μl注入色谱仪，计算不同溶出时间的磺胺甲噁唑平均累积溶出量。结果表明，随着转速与时间的增加，本品溶出量亦相应增加，在150 r/min和45 min时溶出量最大。故采用转篮法，以150 r/min转速进行溶出试验。
4、线性关系考察
精密量取溶液1、2、4、8、10 ml，分别置于10 ml容量瓶中，用0.1 mol/L盐酸溶液并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取10 μl注入色谱仪，并进行线性回归，磺胺甲噁唑的回归方程为Y=27.297 5X+66.532 96（r=0.999 7）；甲氧苄啶的回归方程为Y=13.006 9X+38.596 0（r=0.999 8）。结果表明，磺胺甲噁唑浓度在40.0～400.0 μg/ml、甲氧苄啶浓度在8.0～80.0 μg/ml范围内时线性关系良好。
5、稳定性试验
取同一对照品溶液，精密量取10 μl注入色谱仪，分别在0、2、4、6、8 h测定其峰面积。结果表明，在12 h内对照品溶液磺胺甲噁唑和甲氧苄啶峰面积值无明显变化，磺胺甲噁唑峰面积RSD为0.5%，甲氧苄啶峰面积RSD为0.3%。
6、精密度试验
取同一对照品溶液5份，精密量取10 μl注入色谱仪，以磺胺甲噁唑峰面积计算，结果得RSD为0.3%；以甲氧苄啶峰面积计算，结果RSD为0.6%，表明精密度良好。
7、加样回收率试验
精密称取已知含量的颠茄磺苄啶片样品适量，分别精密加入“2.2”中的对照品溶液0.5 ml，制得加标供试品溶液，精密量取10 μl注入色谱仪，以磺胺甲噁唑峰和甲氧苄啶峰面积计算回收率，结果见表1、2。
8、样品溶出度测定
取本品6片，以0.1 mol/L盐酸液1 000 ml为溶剂，转速为150 r/min，依法（转篮法）操作，45 min时取溶液10 ml，滤过，精密量取续滤液 10 μl，精密量取“2.2”项下对照品溶液10 μl，注入液相色谱仪，共测定3个厂家的6批样品。结果6批样品的溶出量均在80%以上。
三、讨论
颠茄磺苄啶片主要用于治疗慢性菌痢以及肠炎等。服用本药品会产生非常多的不良反应，其中最为常见的就是过敏，严重者会出现红斑，光敏反应等。还有些患者会出现恶心、呕吐、头痛等症状。为了保证颠茄磺苄啶片质量效果，研究者通常会对其溶出度进行测定。
虽然溶出度简单的说就是药物在限定的条件下，能够从固体制剂中溶出的程度以及相对应的速率。对于颠茄磺苄啶片的溶出度进行测定，不仅能够有效的控制颠茄磺苄啶片，还能够满足药典以及法定药品中。颠茄磺苄啶片生产企业通常会借助溶出度对颠茄磺苄啶片生产工艺进行有效控制。随着溶出度研究技术的深入，溶出度指标定会成为反映药品未来发展趋势。本文选择使用高效液相色谱法对颠茄磺苄啶片的溶出度进行测定。研究者结果表明，当磺胺甲噁唑范围高于40μg/ml，但是小于400μg/ml时，吸收度线性关系处于良好关系状态，平均回收率达到了98.7%，当磺胺甲噁唑范围高于8μg/ml，但是小于80μg/ml时，吸收度线性关系处于良好关系状态，平均回收率状态达到了99.1%。这说明使用高效液相色谱法不仅准确，而且简单，而且稳定性也比较高，整体的回收率也非常高，完全可以用来进行颠茄磺苄啶片溶出度测定。而且研究也表明，溶出度的确可以成为颠茄磺苄啶片中的一项质量控制指标。
参考文献：
[1] 周桂坤，闫凤杰，王艳楠. RP-HPLC法测定复方麻黄碱滴鼻液中盐酸麻黄碱的含量[J]. 中国药品标准. 2009（01）
[2] 吴赟，张胜利，王成港. RP-HPLC法测定苯磺酸氨氯地平片的不确定度评定[J]. 现代药物与临床. 2013（04）
[3] 李小燕. RP-HPLC法测定盐酸川芎嗪注射液的含量[J]. 广西医学. 2003（06）
[4] 吴琳，李慧义，丁丽霞，余江南. 国产尼莫地平片的溶出度比较[A]. 药物固体制剂溶出度测定研讨会论文摘要集[C]. 2007
[5] 叶春梅，孟霆，吴灵静，陆宏国. 反相高效液相色谱法测定吡嗪双胍片中格列吡嗪溶出度[A]. 药物固体制剂溶出度测定研讨会论文摘要集[C]. 2007
关键词：高效液相色谱法；颠茄磺苄啶片；溶出度；测定方法；
颠茄磺苄啶片是一种比较常见的处方抗菌药，具有抑菌以及杀菌的功能。现如今，我国药典中已经对该药物的崩解时限进行了明确的规定。本品主要有三种成分构成，分别为磺胺甲噁唑、甲氧苄啶、颠茄流浸膏。这三种成分含量所占比重最高的是磺胺甲噁唑，最低的是颠茄流浸膏，甲氧苄啶介于中间位置。高效液相色谱法应用领域非常广泛，通常是用来测定药品含量，此种测定方法，具有非常多的优势，比如速度快，最长不超过1h，最快5min就能够完成测定；灵敏度非常高；应用范围非常广，绝不大部分有机化合物都可以使用此种方法进行测定。另外，高效液相色谱法所使用的设备不容易发生损坏，可以长期重复使用，应用的样品也不容易破损，还非常容易回收。本文主要是利用高效液相色谱法进行颠茄磺苄啶片溶出度的测定，以便能够找到控制颠茄磺苄啶片质量的新方法。
一、仪器与试药
1、仪器
高效液相色谱仪（美国Agligent公司1100系列，包括Agli-gent四元泵，自动进样器，柱温箱，色谱工作站）；D-800LS型智能溶出试验仪（天津大学仪器厂）。
2、试药
磺胺甲噁唑与甲氧苄啶对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100025-199503，100031-200304）；颠茄磺苄啶片（6批，其中，哈药集团制药六厂2批，批号为070153，060711；新乡同心药业2批，批号为070502，070404；江西汇仁药业2批，批号为0704025，0704023）；乙睛（色谱纯），水（纯化水）。
二、方法与结果
1、色譜条件
色谱柱为XDB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-水-三乙胺（20∶80∶0.2，V/V/V，用冰醋酸调节pH值到6.0），流速为1.2 ml/min，检测波长为240 nm，柱温30℃。理论板数大于5 000，相邻峰分离度大于5.0。
2、对照品溶液的制备
取磺胺甲噁唑对照品40 mg，精密称定，置100 ml容量瓶中，取甲氧苄啶对照品8 mg，精密称定，置同一容量瓶中，加0.1 mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，制成含磺胺甲噁唑400 μg/ml和含甲氧苄啶80 μg/ml的对照品溶液。
3、溶出方法的选择
取本品，照溶出度测定法（转篮法）[4]测定，以0.1 mol/L的盐酸溶液为溶剂，转速分别为50、100、150 r/min，依法操作，分别在5、15、30、45 min时取样10 ml，并同时补充相同温度、相同体积的溶剂，滤过，精密量取续滤液10 μl注入色谱仪，计算不同溶出时间的磺胺甲噁唑平均累积溶出量。结果表明，随着转速与时间的增加，本品溶出量亦相应增加，在150 r/min和45 min时溶出量最大。故采用转篮法，以150 r/min转速进行溶出试验。
4、线性关系考察
精密量取溶液1、2、4、8、10 ml，分别置于10 ml容量瓶中，用0.1 mol/L盐酸溶液并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取10 μl注入色谱仪，并进行线性回归，磺胺甲噁唑的回归方程为Y=27.297 5X+66.532 96（r=0.999 7）；甲氧苄啶的回归方程为Y=13.006 9X+38.596 0（r=0.999 8）。结果表明，磺胺甲噁唑浓度在40.0～400.0 μg/ml、甲氧苄啶浓度在8.0～80.0 μg/ml范围内时线性关系良好。
5、稳定性试验
取同一对照品溶液，精密量取10 μl注入色谱仪，分别在0、2、4、6、8 h测定其峰面积。结果表明，在12 h内对照品溶液磺胺甲噁唑和甲氧苄啶峰面积值无明显变化，磺胺甲噁唑峰面积RSD为0.5%，甲氧苄啶峰面积RSD为0.3%。
6、精密度试验
取同一对照品溶液5份，精密量取10 μl注入色谱仪，以磺胺甲噁唑峰面积计算，结果得RSD为0.3%；以甲氧苄啶峰面积计算，结果RSD为0.6%，表明精密度良好。
7、加样回收率试验
精密称取已知含量的颠茄磺苄啶片样品适量，分别精密加入“2.2”中的对照品溶液0.5 ml，制得加标供试品溶液，精密量取10 μl注入色谱仪，以磺胺甲噁唑峰和甲氧苄啶峰面积计算回收率，结果见表1、2。
8、样品溶出度测定
取本品6片，以0.1 mol/L盐酸液1 000 ml为溶剂，转速为150 r/min，依法（转篮法）操作，45 min时取溶液10 ml，滤过，精密量取续滤液 10 μl，精密量取“2.2”项下对照品溶液10 μl，注入液相色谱仪，共测定3个厂家的6批样品。结果6批样品的溶出量均在80%以上。
三、讨论
颠茄磺苄啶片主要用于治疗慢性菌痢以及肠炎等。服用本药品会产生非常多的不良反应，其中最为常见的就是过敏，严重者会出现红斑，光敏反应等。还有些患者会出现恶心、呕吐、头痛等症状。为了保证颠茄磺苄啶片质量效果，研究者通常会对其溶出度进行测定。
虽然溶出度简单的说就是药物在限定的条件下，能够从固体制剂中溶出的程度以及相对应的速率。对于颠茄磺苄啶片的溶出度进行测定，不仅能够有效的控制颠茄磺苄啶片，还能够满足药典以及法定药品中。颠茄磺苄啶片生产企业通常会借助溶出度对颠茄磺苄啶片生产工艺进行有效控制。随着溶出度研究技术的深入，溶出度指标定会成为反映药品未来发展趋势。本文选择使用高效液相色谱法对颠茄磺苄啶片的溶出度进行测定。研究者结果表明，当磺胺甲噁唑范围高于40μg/ml，但是小于400μg/ml时，吸收度线性关系处于良好关系状态，平均回收率达到了98.7%，当磺胺甲噁唑范围高于8μg/ml，但是小于80μg/ml时，吸收度线性关系处于良好关系状态，平均回收率状态达到了99.1%。这说明使用高效液相色谱法不仅准确，而且简单，而且稳定性也比较高，整体的回收率也非常高，完全可以用来进行颠茄磺苄啶片溶出度测定。而且研究也表明，溶出度的确可以成为颠茄磺苄啶片中的一项质量控制指标。
参考文献：
[1] 周桂坤，闫凤杰，王艳楠. RP-HPLC法测定复方麻黄碱滴鼻液中盐酸麻黄碱的含量[J]. 中国药品标准. 2009（01）
[2] 吴赟，张胜利，王成港. RP-HPLC法测定苯磺酸氨氯地平片的不确定度评定[J]. 现代药物与临床. 2013（04）
[3] 李小燕. RP-HPLC法测定盐酸川芎嗪注射液的含量[J]. 广西医学. 2003（06）
[4] 吴琳，李慧义，丁丽霞，余江南. 国产尼莫地平片的溶出度比较[A]. 药物固体制剂溶出度测定研讨会论文摘要集[C]. 2007
[5] 叶春梅，孟霆，吴灵静，陆宏国. 反相高效液相色谱法测定吡嗪双胍片中格列吡嗪溶出度[A]. 药物固体制剂溶出度测定研讨会论文摘要集[C]. 2007