【摘 要】
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目的:探讨小鼠急性心肌梗死模型巨噬细胞的吞噬功能及丝裂原始化蛋白激酶(MAPK)信号激活情况。方法:对野生型C57BL/6J小鼠进行急性心肌梗死模型,3d时,收取心脏组织进行冰冻切
【机 构】
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首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所教育部心血管重塑相关疾病科研基地建设-心血管重大疾病协同创新中心重点实验室
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目的:探讨小鼠急性心肌梗死模型巨噬细胞的吞噬功能及丝裂原始化蛋白激酶(MAPK)信号激活情况。方法:对野生型C57BL/6J小鼠进行急性心肌梗死模型,3d时,收取心脏组织进行冰冻切片和免疫荧光F4/80(巨噬细胞标志物)染色检测巨噬细胞的浸润情况;体外分离骨髓来源的巨噬细胞和小鼠心肌细胞,用荧光染料对心肌细胞进行标记之后诱导心肌细胞坏死,用坏死心肌细胞碎片刺激巨噬细胞,免疫荧光和流式细胞术检测巨噬细胞对坏死心肌细胞碎片的吞噬能力;利用western检测巨噬细胞吞噬坏死心肌细胞碎片之后MAPK信号通路激活情况。结果:心肌梗死手术后3d,小鼠心脏部位的巨噬细胞浸润明显增加;利用坏死心肌细胞碎片刺激巨噬细胞1h后,免疫荧光confocal检测发现,巨噬细胞对坏死心肌细胞碎片有吞噬能力。流式细胞术检测显示,相比对照组(77.1±1.3)%的巨噬细胞吞噬了坏死心肌细胞碎片(P<0.01)。western检测结果显示,巨噬细胞吞噬坏死心肌细胞碎片之后MAPK信号通路中的p38,Erk,JNK均发生磷酸化。结论:急性心肌梗死早期,心脏组织部位有巨噬细胞的浸润。巨噬细胞可能通过吞噬坏死心肌细胞碎片,促进MAPK信号通路激活,从而介导心肌梗死后的炎症反应。
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