双氢睾酮通过调控孕酮、雌二醇和细胞凋亡参与绵羊子宫功能

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hljhrbsccd
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旨在探究双氢睾酮(dihydrotestosterone, DHT)是否通过调节孕酮(progesterone, P4)、雌二醇(oestrogen, E2)和细胞凋亡参与影响绵羊子宫功能,揭示其在绵羊生殖生理中的潜在作用。本试验以1.5岁左右,雌性小尾寒羊为试验动物,检测卵泡期、黄体期和妊娠期子宫中DHT合成酶和雄激素受体(androgen receptor, AR)的表达变化。随后,体外培养绵羊子宫内膜上皮细胞,并用DHT(10-10~10-7 mol·L-1)和AR拮抗剂氟他胺(Flu,10-8 mol·L-1)处理(n=3)。通过酶联免疫吸附试验、细胞免疫荧光,蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR检测P4和E2水平、合成酶和受体表达。此外,还检测经DHT和Flu处理后,绵羊子宫内膜上皮细胞中凋亡因子Bcl-2相关X 蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)、B细胞淋巴瘤蛋白2(B cell lymphoma protein 2, Bcl-2)、半胱天冬酶3(caspase 3, CASP3)和活化半胱天冬酶3(active-caspase 3, Act-CASP3)的表达变化。结果表明,绵羊子宫不同时期DHT的合成和AR的表达存在差异,妊娠期子宫DHT合成及AR表达显著低于卵泡期和黄体期(P < 0.05)。10-10~10-7 mol·L-1 DHT处理后,P4合成酶表达显著上调(P < 0.05),在10-8~10-7 mol·L-1 DHT时P4合成显著增加(P < 0.05),在10-10~10-8 mol·L-1 DHT时孕酮受体蛋白表达显著增加(P < 0.05),但10-7mol·L-1 DHT时孕酮受体蛋白表达显著下降(P < 0.05);在10-8~10-7 mol·L-1 DHT时E2相关合成酶显著减少,并且E2水平显著下降(P < 0.05),在10-9和10-7 mol L-1 DHT时E2受体ERα蛋白显著下调(P < 0.05),在10-10~10-7 mol·L-1 DHT时ERβ和GPER显著增加(P < 0.05)。经Flu处理后部分解除DHT对P4和E2的调控。此外,10-10~10-7 mol·L-1 DHT显著促进子宫内膜上皮细胞凋亡(P < 0.05)。本研究证实DHT至少部分通过AR调节P4和E2合成及受体表达,影响细胞凋亡,参与调节子宫功能,这为进一步阐明雄激素参与调节子宫功能提供了新的基础和相关数据。
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