转基因大豆MON89788芯片式数字PCR定量方法的建立

• 作 者: 杨镇州 刘刚 梁文
• 机 构: 上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射所生物计量实验室
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2020年5期
• 关键词: 转基因大豆 数字PCR 大豆MON89788
• 基金项目: 国家科技重大专项项目转基因生物新品种培育(2018ZX0801112B);国家自然科学面上基金项目(21775104)

针对抗虫耐除草剂大豆转基因品系MON89788,从转基因植物基因组DNA的提取、核酸模板的质量和浓度控制、引物探针的筛选、PCR反应过程的建立等方面建立了一套完整的转基因大豆芯片式dPCR定量检测方法。本实验也对该方法的重复性和定量检测限进行考察。10组5%转基因品系大豆MON89788样品定量重复性RSD在1.17%-9.97%之间,均满足国际上转基因定量结果RSD小于25%的要求。用该方法对转基因含量为5%、1%、0.1%的大豆MON89788进行定量检测,其定量结果为5.20%、0.94%和0.11