【摘 要】
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以从湖北宜昌、襄阳、荆州、广东东莞、安徽安庆5个地区采集得到的52份土样为试材,分别采用温度筛选法、镜检法、PCR-RFLP法和SDS-PAGE等方法,分离了土壤中的苏云金芽孢杆菌,
【机 构】
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长江大学农学院,湖北荆州434025;湖北省恩施州烟草公司,湖北恩施445000
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以从湖北宜昌、襄阳、荆州、广东东莞、安徽安庆5个地区采集得到的52份土样为试材,分别采用温度筛选法、镜检法、PCR-RFLP法和SDS-PAGE等方法,分离了土壤中的苏云金芽孢杆菌,并鉴定了分离出的Bt菌株的基因型,通过茄二十八星瓢虫二龄幼虫的室内杀虫试验测定分离株的杀虫活性,同时分析了部分Bt菌株的伴孢晶体蛋白,以期挖掘新的Bt菌株资源,筛选出对茄二十八星瓢虫具有高毒力的Bt菌株.结果 表明:分离得到10株含cry3基因的菌株,3株含cry7基因的菌株和2株含cry8基因的菌株,得到1株对茄二十八星瓢虫二龄幼虫有高毒力的Bt菌株,当其伴孢晶体悬浮液的浓度在40 mg·mL-1时,校正死亡率最高可达40.42％;发现YC-2-20、GD-4-1均表达分子量约为67 kDa的晶体蛋白;GD-5-7表达分子量约为130 kDa和80 kDa的晶体蛋白;YC-12-6表达分子量约为130 kDa和70 kDa的晶体蛋白.试验筛选出的Bt菌株为农业生产中茄二十八星瓢虫的绿色防控提供了可应用的菌株及基因资源,同时对延缓害虫抗药性的产生也具有重要意义.
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