【摘 要】
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应用RT-PCR和基因重组技术,从湖南地区丙型肝炎病毒(HCV)感染者血清中克隆了HCV包膜蛋白基因片段(E1,E2/NS1),经与已知基因型的HCV-1,HCV-J,HCV-J6和HCV-J8进行核苷酸序列的比较分析,这些基因片段属1b型HCV基因。将克隆基因重组于表达质
【机 构】
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湖南医科大学附属湘雅医院,日本鹿儿岛大学第二内科
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应用RT-PCR和基因重组技术,从湖南地区丙型肝炎病毒(HCV)感染者血清中克隆了HCV包膜蛋白基因片段(E1,E2/NS1),经与已知基因型的HCV-1,HCV-J,HCV-J6和HCV-J8进行核苷酸序列的比较分析,这些基因片段属1b型HCV基因。将克隆基因重组于表达质粒PMAL-CRI中,在大肠杆菌内进行高效表达,获得了融合蛋白MBP-E1,MBP-E2/NS1,经WesternBlot分析证实这些融合蛋白具有HCV的特异抗原活性,提示这些融合蛋白可用于HCV感染的临床诊断和发病机理的研究。
The HCV envelope protein gene fragment (E1, E2 / NS1) was cloned from the serum of hepatitis C virus (HCV) infected patients in Hunan Province by RT-PCR and gene recombination technology. HCV-J, HCV-J6 and HCV-J8 for nucleotide sequence comparison analysis, these gene fragments are type 1b HCV gene. The fusion protein MBP-E1 and MBP-E2 / NS1 were obtained by recombinant expression in PMAL-CRI plasmid and in E. coli. Western blot analysis confirmed that these fusion proteins possess HCV specific antigen activity, suggesting that these Fusion protein can be used for clinical diagnosis and pathogenesis of HCV infection.
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