hsa—miRNA27a和hsa—miRNA451通过调控MDR1/P—gp的表达和功能参与卵巢癌和乳腺癌细胞耐药

来源 :中国癌症杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weiyuanbin
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景与目的:肿瘤细胞耐药是临床化疗失败的主要原因,微小RNA(microRNA,miRNA)在肿瘤细胞中的异常表达与耐药关系密切。本研究旨在探讨卵巢癌及乳腺癌细胞中hsa-miRNA27a和hsa-miRNA451的表达差异及其与耐药的关系。方法:用浓度递增法建立卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;颈环状引物实时定量聚合酶链反应(stem-loop quantitative real-time PCR,stem-loop RT-PCR)检测卵巢癌耐紫杉醇细胞A2780/Taxol和亲本细胞A2780以及乳腺癌耐阿霉素细胞MCF-7/ADM和亲本细胞MCF-7中hsa-miRNA27a和hsa-miRNA451的表达;利用LipofectamineTM2000分别将成熟miRNA27a的模拟物、阻遏物及阴性对照(negative control,NC)RNA转染A2780和A2780/Taxol细胞,将成熟miRNA451的模拟物及NC转染MCF-7/ADM细胞;RT-PCR技术检测细胞MDR1 mRNA表达;蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况。结果:miRNA27a在A2780/Taxol细胞中高表达,与A2780细胞相比,表达增高2.2±0.30倍,差异有统计学意义(P<0.05);miRNA451在MCF-7/ADM细胞中低表达,与MCF-7细胞相比,表达降低84%,差异有统计学意义(P<0.05)。A2780/Taxol细胞转染miRNA27a阻遏物后,MDR1 mRNA表达明显下降,与转染NC组相比,表达下降(39±0.14)%,差异有统计学意义(P<0.05)。P-gp相对表达量[(26±5.3)%)]与转染NC组的P-gp相对表达量[(43±6.7)%]比较,下降39%,差异有统计学意义(P<0.05)。对紫杉醇的敏感性增加,半数抑制浓度(IC50)为0.53μmol/L,与转染NC组IC50(6.8μmol/L)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。A2780细胞转染miRNA27a模拟物后,细胞的MDR1 mRNA表达升高,与转染NC组相比,升高(121±0.11)%,差异有统计学意义(P<0.05);细胞对紫杉醇的敏感性下降,IC50为0.2μmol/L,与转染NC组IC50(0.06μmol/L)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。MCF-7/ADM细胞转染miRNA451模拟物后,MDR1 mRNA表达明显下降,与转染NC组细胞相比,表达下降(65±12)%,差异有统计学意义(P<0.05);P-gp相对表达量[(31±19)%)]与转染NC组细胞P-gp相对表达量[(83±12)%]相比,下降62%,差异有统计学意义(P<0.05);对阿霉素的敏感性增加,IC50为4.61μmol/L,与转染NC组细胞IC50(26μmol/L)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在卵巢癌耐紫杉醇细胞A2780/Taxol和乳腺癌耐阿霉素细胞MCF-7/ADM中,miRNA27a和miRNA451分别异常表达,它们可能分别通过间接或直接作用于MDR1/P-gp,参与肿瘤细胞耐药的发生、发展。
其他文献
[目的]产业结构与城市空间形态之间存在相互作用关系,以乌鲁木齐市产业结构演替与城市空间形态演变为出发点,定量测度两个系统在城市发展不同阶段的耦合过程及特征。[方法]选
确定中央分隔带开口间距,是路口禁左而在下游路段掉头时需要研究的关键问题。借鉴高速公路的相关交织理论,建立了远引掉头方式下中央分隔带开口间距模型,并利用微观仿真法进
话剧在中国已有一个世纪的历史了,在这百年的时光里,话剧一直被奉为“高雅艺术”,与大众那么近,又那么远。列夫·托尔斯泰对这门艺术的理解更能形象地阐述它的特性:“作为一种艺术
报纸
目的:探讨磁共振检查诊断心房粘液瘤的价值。材料与方法:左房粘液瘤3例,右房粘液瘤1例,行多方位磁共振平扫电影检查。结果:平扫显示瘤体较清晰,T1WI呈均匀和不均匀较高信号,T2WI呈高
应用型高校学生的职业核心素养培育不仅有利于提升学生的职业能力,而且有利于培养学生正确的职业价值观。可通过建构以能力和品格并重的应用型高校职业培养目标体系、"通识型
<正>关注依法治企党的十八届四中全会对全面推进依法治国作出重要部署。企业是社会的基本单元,坚持依法从严治企,是依法治国基本方略在企业落地的根本要求。一方面,从宏观政
本研究在总结原有研究的基础上对从两所不同小学的三至六年级 646名儿童中鉴别出的 5 7名学习困难儿童的同伴关系进行了比较研究 ,结果发现 :学习困难儿童比非学习困难儿童更
在高精度重力测量中,发现同一异常体的实测重力异常与牛顿定律计算出的理论异常不相符,实测异常的极值幅值近2倍于计算异常的极值幅。而且,实测重力异常的极值向两翼衰减很快,其梯
<正>什么都可以开发,什么都可以卖钱,但搞乱了再重来就很困难。11月6日,北京市朝阳区政府对外宣布成立北京奥林匹克公园管理委员会,与天安门管委会、CBD管委会类似,这一管委
随着新媒体技术的不断发展,三微一端的广泛应用,新媒体环境下也营造了一种新的场景。文章将微信传播放置在新的场景下研究,运用微信功能和传播特点探究场景理论下微信营造的