【摘 要】
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为在大肠埃希菌中表达金黄色葡萄球菌SirH主要抗原表位区并制备相应纯化重组蛋白的抗血清,通过生物信息学软件分析SirH的主要抗原表位区,PCR扩增SirH主要抗原表位区的编码序
【机 构】
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贵阳医学院生物技术教研室,贵州民族大学化学与环境科学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31360084）, 贵州省科技厅社发项目（黔科合[2010]3144）, 贵州省卫生厅科学技术基金项目（gzwkj2011-1-018）, 贵阳医学院博士启动基金项目（K2010-32）, 贵州省科技厅科学技术基金项目（黔科J字[2010]2273）
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为在大肠埃希菌中表达金黄色葡萄球菌SirH主要抗原表位区并制备相应纯化重组蛋白的抗血清,通过生物信息学软件分析SirH的主要抗原表位区,PCR扩增SirH主要抗原表位区的编码序列,插入表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达载体pGEX4T1-sirH。该载体经酶切和DNA测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达,GST亲和层析纯化获得重组蛋白后,采用Western blot方法检测目的蛋白的反应原性。用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,间接ELISA检测抗血清效价。结果显示
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