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建立了高效液相色谱-串联质谱法（HPLC—MS／MS）测定蜂胶原胶中氯霉素残留量的分析方法。样品用叔丁基甲醚溶解，氢氧化钠溶液去除黄酮类等杂质，叔丁基甲醚层加正己烷降低氯霉素的溶解度，再用乙酸钠缓冲液反萃氯霉素，反萃溶液调至碱性后用乙酸乙酯萃取，经浓缩、复溶和过滤后，进行测定。采用甲醇-水（65：35，体积比）为流动相，反相AtlantisT，色谱柱进行液相色谱分离，电喷雾负离子电离（ESI-），多反应监测模式（MRM）进行检测，内标法定量。结果表明，氯霉素在0．1—5．0μg／L范围内线性关系良好；方法