2D—DIGE—HPLC—nESIMS／MS对2，4-二硝基苯磺酸损伤HaCaT细胞差异蛋白质的鉴定

• 作 者: 孙明忠 杨帆 侯志杰 郭春梅 郭一萌 刘淑清
• 机 构: 大连医科大学生物技术系,大连医科大学生物化学教研室
• 出 处: 分析测试学报
• 发表日期: 2011年2期
• 关键词: 2 4-二硝基苯磺酸 职业暴露 2D—DIGE HPLC—nESI MS/MS HACAT 2 4-dinitrobenzene sulfonic acid
• 基金项目: 教育部留学回国人员科研启动基金资助项目,辽宁省自然科学基金资助项目（2008S077）,辽宁教育厅重点实验室项目（LS2010050）

采用Cy2、Cy3和Cy5荧光染料标记蛋白，建立了人角质形成细胞HaCaT受2，4-二硝基苯磺酸（DNBS）刺激前后的双向胶内差异凝胶电泳（2D—DIGE）图谱，每组平行样本数为3。凝胶采用蛋白荧光染料Deep Purple进行后染色（Post—stain）。DeCyder定量分析软件在每块凝胶上平均检测到1200个以上蛋白斑点，每块胶上都匹配得到的相同蛋白质斑点有846个。其中有7个斑点丰度变化在50％以上，统计学意义显著（P值小于0．05）。利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC—nESI MS／