稳定表达中国人常见GJB2基因突变细胞系的建立

• 作 者: 张延平 张晓强 刘雅莉 黄玮 孙玉蕊
• 机 构: 中国人民解放军第309医院耳鼻喉科,河南省医学情报研究所,河南省卫生厅
• 出 处: 中国听力语言康复科学杂志
• 发表日期: 2011年4期
• 关键词: 感音神经性耳聋 缝隙连接 突变 Sensorineural hearing loss Gap junction Mutation
• 基金项目: 基金项目：全军”十一五”项目归国人员课题（06H048）国家自然科学基金面上项目青年基金（30700936）：中国人民解放军第309医院院内基金（LCB08MSl2、309-09-03）

目的将中国人常见GJB2基因突变c．235delC真核表达载体稳定转染入HEK293细胞，建立稳定表达人c．235delC的HEK293细胞系。方法将pcx26-EGFP和pcx26—235delc—EGFP转染HEK293细胞。24h后加G418筛选两周，使用FCM分选GFP阳性细胞，继续培养。蛋白免疫印迹检测GFP表达，激光共聚焦显微镜检测蛋白表达。结果蛋白免疫印迹显示稳定转染人pcx26－EGFP和pcx26—235delC--EGFP的HEK293细胞都能够检测到GFP的蛋白条带，显微镜下可见稳定