【摘 要】
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目的 探究枸杞皂苷介导Suv39H1/JAK2/STAT3通路对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 将人鼻咽癌CNE-2细胞株分为枸杞皂苷干预组(5,10,50μmol/L枸杞皂苷)及对照组,采用CCK-8检测不同浓度枸杞皂苷作用0,24,48和72 h时CNE-2细胞增殖率,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测枸杞皂苷干预48 h后CNE-2细胞凋亡率,Transwell小室实验检测CNE-2细胞侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(We
【机 构】
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空军军医大学第一附属医院西京医院耳鼻咽喉头颈外科,西安 710032
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目的 探究枸杞皂苷介导Suv39H1/JAK2/STAT3通路对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 将人鼻咽癌CNE-2细胞株分为枸杞皂苷干预组(5,10,50μmol/L枸杞皂苷)及对照组,采用CCK-8检测不同浓度枸杞皂苷作用0,24,48和72 h时CNE-2细胞增殖率,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测枸杞皂苷干预48 h后CNE-2细胞凋亡率,Transwell小室实验检测CNE-2细胞侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测组蛋白甲基化酶Suv39H1的表达水平;采用qRT-PCR和Western blot分别检测Suv39H1在鼻咽癌组织和癌旁组织,以及鼻咽癌细胞系(HONE1,C666-1,CNE-1和CNE-2)和人鼻咽癌上皮细胞(NP69)中的表达差异;构建Suv39H1过表达载体(pcDNA-Suv39H1)以及针对Suv39H1的小干扰RNA(Suv39H1 siRNA),分别转染于CNE-2细胞,检测细胞增殖、侵袭和凋亡;将pcDNA-Suv39H1载体转染于50μmol/L枸杞皂苷干预的细胞中,分别检测细胞增殖、侵袭和凋亡.Western blot检测JAK2/STAT3通路相关蛋白p-JAK2和p-STAT3的表达.结果 与对照组相比,枸杞皂苷干预鼻咽癌CNE-2细胞呈剂量依赖性降低细胞增殖(F=12.030,P=0.0025)和侵袭(F=4.807,P=0.0315),增加细胞凋亡率(F=5.232,P=0.0261),抑制Suv39H1蛋白表达(F=14.64,P=0.0013);与正常组织和NP69细胞相比,鼻咽癌组织和HONE1,C666-1,CNE-1,CNE-2细胞中Suv39H1表达水平显著升高(P<0.01);转染pcDNA-Suv39H1组细胞增殖、侵袭率增强、凋亡率降低;转染Suv39H1 siRNA组细胞增殖、侵袭率降低,凋亡率升高,差异与对照组相比具有统计学意义(P<0.01);与50μmol/L枸杞皂苷干预组相比,转染pcDNA-Suv39H1组细胞增殖、侵袭率增加、凋亡率降低,p-JAK2和p-STAT3蛋白表达升高(P<0.01).结论 枸杞皂苷通过下调Suv39H1/JAK2/STAT3通路抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖、侵袭,促进凋亡.
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