贵州木霉NJAU4742几丁质酶基因chi 8的克隆、表达和酶学特性研究

• 作 者: 王小松 马磊 刘志颖 李托 朱瀚 刘东阳 沈其荣
• 机 构: 南京农业大学江苏省固体有机废弃物资源化高技术研究重点实验室
• 出 处: 南京农业大学学报
• 发表日期: 2021年1期
• 关键词: 贵州木霉 几丁质酶 异源表达 酶学特性 壳寡糖 蛋白同源建模 Trichoderma guizhouense chitinase heterologous ex
• 基金项目: 国家自然科学基金项目(31972513),江苏省农业科技自主创新资金项目,江苏省重点研发计划(现代农业)项目(BE2018338)

[目的]本研究旨在从贵州木霉(Trichoderma guizhouense NJAU4742)菌株中克隆、表达几丁质酶基因chi 8并深入研究其酶学特性,分析Chi8水解胶体几丁质的产物,为其在农业生产中的实际应用提供理论依据。[方法]基于序列比对获取chi 8与其他几丁质酶基因的同源关系,并设计引物扩增得到完整的chi 8序列,利用pET-29a质粒和大肠杆菌BL21进行异源表达;经镍柱纯化后并研究Chi8酶学特性;利用MALDI-TOF/MS检测Chi8水解胶体几丁质的最终产物;基于同源建模法构建C