豆制品转基因检测中不同DNA提取方法的比较

• 作 者: 孙梦梦 黄欢欢 沈晓芳 庞月红
• 机 构: 江南大学食品学院
• 出 处: 江苏农业科学
• 发表日期: 2019年04期
• 关键词: 大豆MON 89788 豆制品 DNA提取 琼脂糖凝胶电泳

高品质的DNA是分子生物学研究的关键,大豆及豆制品中含有较多的蛋白质、酚类、糖类和脂类物质,从中提取高品质的DNA比较困难。拟采用十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate,简称SDS）法、改良CTAB法、十六烷基三甲基溴化铵（hexadecyl trimethyl ammonium bromide,简称CTAB）法、SDS-聚乙烯吡咯烷酮（简称SDS-PVP）法和TIANGEN试剂盒法对大豆MON 89788、小黄豆、豆腐及大豆油中的DNA进行提取,对试验过程中的蛋白酶K、RNA酶A的浓度进行优化,并对DNA浓度及纯度进行综合分析。结果表明,对于大豆MON 89788、小黄豆和豆腐,用SDS法提取的DNA的D_{260 nm}/D_{280 nm}值在1.8左右,DNA产量最高,用改良CTAB法提取的DNA的D_{260 nm}/D_{280 nm}值在1.8左右,用TIANGEN试剂盒法提取的DNA的D_{260 nm}/D_{280 nm}值在1.75左右,2种方法的DNA产量均比SDS法低,而用SDS-PVP法与CTAB法提取的DNA含有较多杂质。综合分析可知,大豆油的最佳DNA提取方法为改良CTAB法。