【摘 要】
：
用Sau3AI消化呋喃丹降解菌Sphingomonas sp.CDS-1的基因组DNA,将所得DNA片段与BamHⅠ酶切的启动子探针载体pRobe-GFP酶连后转化E.coli DH5α感受态细胞,在选择性平板上培养,
【机 构】
：
南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,南京,210095
论文部分内容阅读
用Sau3AI消化呋喃丹降解菌Sphingomonas sp.CDS-1的基因组DNA,将所得DNA片段与BamHⅠ酶切的启动子探针载体pRobe-GFP酶连后转化E.coli DH5α感受态细胞,在选择性平板上培养,从大约1×104个菌落中筛选到50个含启动子片段的阳性克隆.挑选其中一个发光强度最强的阳性克隆F7,将它的重组质粒pF7用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后得到包含sphingomonas sp.CDS-1启动子和gfp基因的DNA片段,将该片段克隆到广宿主载体pPZP201上,得到pPZP201-gfp质粒.将pPZP201-gfp通过三亲接合转移至Sphingomonas sp.CDS-1中得到GFP标记菌株CDS-gfp,经荧光显微镜观察,gfp基因在CDS-gfp中表达量很高.对标记菌株进行连续传代10次(48h/次),发现pPZP201-gfp依然存在,而且发光明显.通过Not Ⅰ酶切位点把linA基因连接到pUT/mini-Tn5上构建新的转座子载体pUT/mini-Tn5-linA.以pRK600为辅助质粒将pUT/mini-Tn5-linA引入到CDS-1中,linA基因通过转座作用,插入到CDS-gfp的染色体中,得到双标记菌株CDS-GFP-LinA.该菌株是一株能同时降解γ-六六六和呋喃丹的基因工程菌,本研究的结果为研究Sphingomonas sp.CDS-1的生态学行为奠定了基础.
其他文献
在当今改革开放和市场经济的新形势下，企业思想政治工作只有尽快适应当前的市场经济，才能充分发挥其应有的作用。本文首先阐述思想政治工作对企业的作用，然后分析当前企业思想政
中国人工智能学会智能产品与产业工作委员会2005年2月在北京成立。工委会作为中国人工智能学会联系学界、产业和市场的窗口,代表学会重点开展五类工作:智能产品的技术鉴定、
离岸金融中心自上世纪50年代以来快速发展,如今在国际金融体系中扮演着重要作用.但随着主权国家对离岸金融的监管趋于严格以及离岸金融中心之间的竞争加大,离岸金融业务面临
“全国智能机器人创新联盟”是由中国人工智能学会等多家国家一级学会共同发起,开展工业机器人、服务机器人、特种机器人等科技创新、研-产-资合作、成果转化、技术交流与交
在我国市场经济不断发的条件下，企业是自主经营、自负盈亏、独立核算的经济实体，其经济行为与经济利益是紧密联系在一起的。追求利益最大化成为企业的最终目标。同时，市场经济更
政治学·哲学·经济学·法学·教育学政治学研究论毛泽东文化批判的思想和实践杨东升 ( 1· 4 0 )…………………………………………………………………………………传统文化
德国3S智能软件系统方案有限公司（3S-Smart Software Solutions GmbH）不仅是一家行业经验丰富的高科技IT公司，同时也是全球范围内工业信息技术、自动化编程软件和智能装备编程开
亿赞普公司是一家高科技公司，正在通过技术、商业模式的创新，构筑世界级的互联网媒体及电子商务平台。亿赞普率先提出“大数据营销战略”,提供面向大型品牌广告主的互联网全案