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RFLP分子标记是用限制性酶（RE）消化不同个体的同源DNA分子，经电泳表现的限制性片段长度的差异。它反映了DNA分子水平上的变异，可能是限制性内切酶识别位点的改变，也可能是部分片段的缺失、插入、易位、倒位等，显示出丰富的多态性。本文综述了RFLP分子标记技术在牧草个体识别、绘制遗传图谱、目的基因定位、检测群体内或群体间序列差异程度以及辅助育种研究中的应用等，并对该技术在牧草研究中的应用作了展望。