论文部分内容阅读
为构建新城疫病毒乳酸菌穿梭表达载体,采用RT—PCR方法从新城疫病毒中扩增了I-IN基因,将其克隆到pMD18-T SimpleVector中。经测序鉴定正确后,定向克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,并转化入表达宿主菌BL21(DE3),利用帆诱导表达。采用SDS—PAGE和Westernblotting检测重组菌在大肠杆菌中的表达情况。结果表明:NDVHN基因-9表达载体pW425et正确重组,且该重组菌传50代次以上,重组质粒依然稳定。SDS—PAGE显示表达出约63kD的条带,与已知表达的HN蛋