抗KOD聚合酶单克隆抗体的制备

• 作 者: 余晓岚 李玉 王飞 钟星 陈亮 马立新
• 机 构: 湖北大学生命科学学院
• 出 处: 化学与生物工程
• 发表日期: 2010年3期
• 关键词: KOD聚合酶 单克隆抗体 ELISA检测 制备 KOD DNA polymerase monoclonal antibody（McAb） ELISA as
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30801008）,国家863计划资助项目（2006AA02A310）,湖北省自然科学基金资助项目（2008CDB110）

单克隆抗体具有高度的均一性和专一性。抗KOD聚合酶单克隆抗体，可以特异性结合于KOD聚合酶，抑制PCR反应前常温状态下的多聚酶活性，显著提高PCR反应的特异性。为了提高KOD聚合酶PCR反应的特异性，以KOD聚合酶为抗原，制备了两株抗KOD聚合酶的单克隆抗体。以大肠杆菌表达的重组蛋白KOD聚合酶为抗原免疫BALB／c小鼠，然后将免疫小鼠的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，通过HAT选择培养、ELISA检测和有限稀释法克隆，建立了2株能稳定分泌抗KOD聚合酶单克隆抗体的杂交瘤细胞，分别命名为1F5与3G6，