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摘要：目的：探讨实时定量方法与酶联免疫吸附试验方法对疱疹病毒检验效果的对比研究。方法：以2013年9月～2014年6月作为研究区间，选择该时间段内我院住院部所收治的疱疹病毒感染患者共计50例作为研究对象，将其设置为观察组。同时，选择同期我院住院部所收治的皮肤科疾病患者共计50例作为研究对象，将其设置为对照组。检测过程当中使用仪器为全自动实时荧光监测仪，以及配套检测试剂，同时准备阴性，阳性质控物。结果：观察组患者使用定时定量方法与酶联免疫吸附实验方法检验结果均与对照组对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义；观察组组内，定时定量方法检出率明显高于酶联免疫吸附实验方法检出率，对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义。结论：定时定量检验方法对疱疹病毒有确切的检验效果，检出率高，可将其作为临床对疱疹病毒的基础检验方法，进一步推广应用。
关键词：定量方法；酶联免疫吸附试验；疱疹病毒；检验
当前临床上还没有治疗疱疹病毒的特异性药物，为了能够尽早的实现对疱疹病毒患者的预防与治疗，就需要实现早期的检测[1-2]。为观察对比定时定量方法与酶联免疫吸附试验方法对疱疹病毒的检验效果，本文以2013年9月～2014年6月作为研究区间，选择该时间段内我院住院部所收治的疱疹病毒感染患者共计50例作为研究对象，同时选择同期50例非疱疹病毒作为对照，同时应用两种方法展开检验，对比检验结果，取得了确切结论，报告如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
以2013年9月～2014年6月作为研究区间，选择该时间段内我院住院部所收治的疱疹病毒感染患者共计50例作为研究对象，將其设置为观察组。观察组50例患者中，31例为男性患者，19为女性患者，患者年龄区间为20～60周岁，平均年龄为（41.1±2.3）岁，18例患者为疱疹性口腔炎，12例患者为唇疱疹，20例患者为皮肤疱疹。同时，选择同期我院住院部所收治的皮肤科疾病患者共计50例作为研究对象，将其设置为对照组，排出存在疱疹感染症状的患者。对照组50例患者中，30例为男性患者，20为女性患者，患者年龄区间为20～65周岁，平均 年龄为（42.8±1.9）岁。两组患者一般资料进行对比分析，未发现明显差异，P>0.05，具有可比性。
1.2 方法
检测过程当中使用仪器为西安天隆TL998全自动实时荧光监测仪，以及配套检测试剂，同时准备阴性，阳性质控物。检验开始前准备棉拭子，处于半干状态下，取患者患病部位的分泌物以及疱液，将其放置于1.0mL剂量的磷酸盐缓冲液当中，送检。取出标本通过模板进行制备，称取其中100.0μL剂量标本液以及1000.0μL磷酸盐，充分混合均匀并做离心处理。离心处理条件为：5000r/min，持续离心处理5.0min，去除上层清液，并将沉淀物捞出，然后进行模板制备工作。准备1000.0μL剂量磷酸盐，与沉淀物充分混合均匀，煮沸后持续20.0min，进一步做离心处理。离心处理条件为：5000r/min，持续时间为5.0min，去除上层清液，分别进行检验。
定时定量检验方法为：严格按照试剂盒操作说明展开检验作业，对试剂进行定量称取，引物浓度按照50ρmol/L标准进行控制，模板用量取值为10.0μL，完成以上操作后，在定时定量检测仪支持下进行检测，检测条件为91.0℃，持续变性时间为30.0s，后调整为56.0℃，30.0s复性，71.0℃条件下60.0s引物延伸。以上操作为一个循环，共循环40次，反应完成后对CT值以及DNA数量进行分析。
酶联免疫吸附试验方法参照常规模式进行，检测仪器由丹麦公司提供，引入质控标准，进行样本培养并完成鉴定工作。
1.3 观察指标
对两组患者在两种不同检验方法下的检验数据进行对比观察。
1.4 统计学处理
本文数据使用SPSS 17.0软件进行分析与计算，计数资料以%表示，以χ2检验，可信区间95%，检验水准为0.05，当 P<0.05时为差异显著，且具有统计学意义。
2 结果
观察组患者使用定时定量方法与酶联免疫吸附实验方法检验结果均与对照组对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义；观察组组内，定时定量方法检出率明显高于酶联免疫吸附实验方法检出率，对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义。具体数据如表1所示。
3 讨论
本次研究数据显示：观察组患者使用定时定量方法与酶联免疫吸附实验方法检验结果均与对照组对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义，根据该数据认为临床检验是早期确诊疱疹病毒的有效手段之一。同时数据研究发现：观察组组内，定时定量方法检出率明显高于酶联免疫吸附实验方法检出率，对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义。相较于定时定量的检验方法而言，酶联免疫吸附实验方法在一定程度上受到时间、空间因素的限制影响，检测时间需要抗体产生一段时间，再加之技术设备存在不完善的问题，因而容易对疱疹病毒进行检验的过程当中出现误差[3]，在作用于疱疹病毒早期检测的过程当中存在一定局限性。而对于定时定量检验方法而言，除能够使检验耗时得到合理控制以外，整个检验过程中不需要做培养以及细菌鉴定工作，故而具有较好的操作性。有关研究数据也指出：定时定量方法检验疱疹病毒具有较高的敏感度与特异性，故而可将其作为基础检验方法之一，在临床实践中加以推广。
综合以上分析认为，定时定量检验方法对疱疹病毒有确切的检验效果，检出率高，可将其作为临床对疱疹病毒的基础检验方法，进一步推广应用。
参考文献：
[1]陈源红，周正东，曾怡等.百色市献血人群中卡波氏肉瘤相关疱疹病毒DNA的套式PCR检测[J].重庆医学，2013，42（19）：2204-2205.
[2]郑毅，高应林，张凡雄等.荧光定量PCR同步检测人类疱疹病毒6，7，8型方法的建立[J].武汉大学学报（医学版），2013，34（1）：9-13.
[3]胡晓艳，冯家望，宋家武等.PCR方法扩增性传播泌尿生殖道感染常见病原体序列的通用引物[J].中国皮肤性病学杂志，2012，26（10）：886-889.
关键词：定量方法；酶联免疫吸附试验；疱疹病毒；检验
当前临床上还没有治疗疱疹病毒的特异性药物，为了能够尽早的实现对疱疹病毒患者的预防与治疗，就需要实现早期的检测[1-2]。为观察对比定时定量方法与酶联免疫吸附试验方法对疱疹病毒的检验效果，本文以2013年9月～2014年6月作为研究区间，选择该时间段内我院住院部所收治的疱疹病毒感染患者共计50例作为研究对象，同时选择同期50例非疱疹病毒作为对照，同时应用两种方法展开检验，对比检验结果，取得了确切结论，报告如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
以2013年9月～2014年6月作为研究区间，选择该时间段内我院住院部所收治的疱疹病毒感染患者共计50例作为研究对象，將其设置为观察组。观察组50例患者中，31例为男性患者，19为女性患者，患者年龄区间为20～60周岁，平均年龄为（41.1±2.3）岁，18例患者为疱疹性口腔炎，12例患者为唇疱疹，20例患者为皮肤疱疹。同时，选择同期我院住院部所收治的皮肤科疾病患者共计50例作为研究对象，将其设置为对照组，排出存在疱疹感染症状的患者。对照组50例患者中，30例为男性患者，20为女性患者，患者年龄区间为20～65周岁，平均 年龄为（42.8±1.9）岁。两组患者一般资料进行对比分析，未发现明显差异，P>0.05，具有可比性。
1.2 方法
检测过程当中使用仪器为西安天隆TL998全自动实时荧光监测仪，以及配套检测试剂，同时准备阴性，阳性质控物。检验开始前准备棉拭子，处于半干状态下，取患者患病部位的分泌物以及疱液，将其放置于1.0mL剂量的磷酸盐缓冲液当中，送检。取出标本通过模板进行制备，称取其中100.0μL剂量标本液以及1000.0μL磷酸盐，充分混合均匀并做离心处理。离心处理条件为：5000r/min，持续离心处理5.0min，去除上层清液，并将沉淀物捞出，然后进行模板制备工作。准备1000.0μL剂量磷酸盐，与沉淀物充分混合均匀，煮沸后持续20.0min，进一步做离心处理。离心处理条件为：5000r/min，持续时间为5.0min，去除上层清液，分别进行检验。
定时定量检验方法为：严格按照试剂盒操作说明展开检验作业，对试剂进行定量称取，引物浓度按照50ρmol/L标准进行控制，模板用量取值为10.0μL，完成以上操作后，在定时定量检测仪支持下进行检测，检测条件为91.0℃，持续变性时间为30.0s，后调整为56.0℃，30.0s复性，71.0℃条件下60.0s引物延伸。以上操作为一个循环，共循环40次，反应完成后对CT值以及DNA数量进行分析。
酶联免疫吸附试验方法参照常规模式进行，检测仪器由丹麦公司提供，引入质控标准，进行样本培养并完成鉴定工作。
1.3 观察指标
对两组患者在两种不同检验方法下的检验数据进行对比观察。
1.4 统计学处理
本文数据使用SPSS 17.0软件进行分析与计算，计数资料以%表示，以χ2检验，可信区间95%，检验水准为0.05，当 P<0.05时为差异显著，且具有统计学意义。
2 结果
观察组患者使用定时定量方法与酶联免疫吸附实验方法检验结果均与对照组对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义；观察组组内，定时定量方法检出率明显高于酶联免疫吸附实验方法检出率，对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义。具体数据如表1所示。
3 讨论
本次研究数据显示：观察组患者使用定时定量方法与酶联免疫吸附实验方法检验结果均与对照组对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义，根据该数据认为临床检验是早期确诊疱疹病毒的有效手段之一。同时数据研究发现：观察组组内，定时定量方法检出率明显高于酶联免疫吸附实验方法检出率，对比存在显著差异，P<0.05，具有统计学意义。相较于定时定量的检验方法而言，酶联免疫吸附实验方法在一定程度上受到时间、空间因素的限制影响，检测时间需要抗体产生一段时间，再加之技术设备存在不完善的问题，因而容易对疱疹病毒进行检验的过程当中出现误差[3]，在作用于疱疹病毒早期检测的过程当中存在一定局限性。而对于定时定量检验方法而言，除能够使检验耗时得到合理控制以外，整个检验过程中不需要做培养以及细菌鉴定工作，故而具有较好的操作性。有关研究数据也指出：定时定量方法检验疱疹病毒具有较高的敏感度与特异性，故而可将其作为基础检验方法之一，在临床实践中加以推广。
综合以上分析认为，定时定量检验方法对疱疹病毒有确切的检验效果，检出率高，可将其作为临床对疱疹病毒的基础检验方法，进一步推广应用。
参考文献：
[1]陈源红，周正东，曾怡等.百色市献血人群中卡波氏肉瘤相关疱疹病毒DNA的套式PCR检测[J].重庆医学，2013，42（19）：2204-2205.
[2]郑毅，高应林，张凡雄等.荧光定量PCR同步检测人类疱疹病毒6，7，8型方法的建立[J].武汉大学学报（医学版），2013，34（1）：9-13.
[3]胡晓艳，冯家望，宋家武等.PCR方法扩增性传播泌尿生殖道感染常见病原体序列的通用引物[J].中国皮肤性病学杂志，2012，26（10）：886-889.