【摘 要】
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为了实现羰基还原酶基因mldh在枯草芽胞杆菌中的高效表达,以摩氏摩根菌Morganella morganii CMCC(B)49208染色体DNA为模板,PCR扩增得到目的基因mldh,分别与启动子PQ和启动子p
【机 构】
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江南大学工业生物技术教育部重点实验室粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
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为了实现羰基还原酶基因mldh在枯草芽胞杆菌中的高效表达,以摩氏摩根菌Morganella morganii CMCC(B)49208染色体DNA为模板,PCR扩增得到目的基因mldh,分别与启动子PQ和启动子p43进行连接,构建不同启动子组合的表达载体PHY-p43-mldh、PHY-PQ-mldh、PHY-p43-p43-mldh和PHY-p43-PQ-mldh,化学法转化B.subtilis Wb600后对重组菌细胞破碎液进行SDS-PAGE分析及全细胞生物转化反应实验发现,4种重组菌的转化能力差异显著,其中重组菌B.subtilis Wb600(PHY-p43-p43-mldh)进行全细胞转化反应,转化液中d-伪麻黄碱的浓度最高,达到142.1 mg/L,底物转化率为78.25%,成功实现了羰基还原酶基因mldh在枯草芽胞杆菌中的高效表达。
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