【摘 要】
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目的利用CRISPR／Cas9技术建立YAF2（YYlassociatedfactor2）基因敲除的宫颈癌HeLa细胞株，用于YAF2基因在宫颈癌细胞中分子功能的研究。方法首先利用CRISPR／Cas9序列设计网站，设计两对
【机 构】
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中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系、医学分子生物学国家重点实验室
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目的利用CRISPR／Cas9技术建立YAF2（YYlassociatedfactor2）基因敲除的宫颈癌HeLa细胞株，用于YAF2基因在宫颈癌细胞中分子功能的研究。方法首先利用CRISPR／Cas9序列设计网站，设计两对靶向YAF2基因第2外显子不同位点的向导RNA（single-guide RNA，sgRNA）。化学合成sgRNA寡核苷酸序列，分别克隆至质粒pX335中，测序确认插入片段正确的克隆。先用一对重组载体转染HeLa细胞，7天后，再用另一对转染HeLa细胞，第2对转染3天后，取培养细胞的2
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