可视化核酸等温扩增方法快速检测羊肉源性成分

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目的 建立羊肉源性成分核酸等温扩增可视化快速检测方法.方法 用加热煮沸方法直接提取羊肉标本中的DNA;根据羊属特异性的Cytb基因序列的片段设计扩增引物,优化反应体系和反应条件,确立最佳等温扩增温度和扩增时间,对羊肉制品进行可视化等温扩增.并将建立的核酸等温扩增方法与荧光定量PCR法进行实际样品的检测.结果 建立的可视化核酸等温扩增快速检测方法最佳的等温扩增温度和扩增时间为65℃30 min;该方法的最低检测限为1 μg;对肉制品中目标检测物具有高度特异性.本研究对实际样品的检测结果与荧光PCR方法一致.结论 该方法用于羊肉源性成分快速检测,具有操作简便、敏感性高、特异性强以及检测结果可肉眼观察等特点,适用于在超市、农贸市场进行羊肉类成分的现场快速检测.
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