【摘 要】
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为建立一种针对β-玉米赤霉烯醇(β-ZOL)快速准确的检测方法,笔者用活性酯法将β-ZOL与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联合成人工完全抗原,纯化鉴定后免疫BALB/c小鼠.
【机 构】
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扬州大学兽医学院,江苏扬州225009;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州 225009
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为建立一种针对β-玉米赤霉烯醇(β-ZOL)快速准确的检测方法,笔者用活性酯法将β-ZOL与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联合成人工完全抗原,纯化鉴定后免疫BALB/c小鼠.经筛选最终获得1株稳定分泌β～-ZOL抗体的细胞株1F5.利用该抗体建立检测β-ZOL的间接竞争酶联免疫吸附试验(CiELISA)方法.结果 显示,β-ZOL的药物抑制标准曲线在浓度为5～500 ng/mL时线性关系良好,标准曲线方程为y=0.406 3x-0.204 2(R2=0.990 4),IC50为53.19 ng/mL,检测下限(LOD)为6 ng/mL.该单克隆抗体对β-ZOL的抑制率为100％,与α-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮、β-雌二醇、呕吐毒素、伏马毒素等基本无交叉反应.牛奶样品β-ZOL添加回收试验显示,β-ZOL的回收率为91.24％～110.07％,变异系数为6.17％～8.73％.说明建立的检测β-ZOL的CiELISA方法稳定可靠.
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