他克莫司对人外周血树突状细胞成熟的影响及免疫调控机制的研究

来源 :中华器官移植杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ZXCVB1230ZXCVB
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目的 研究他克莫司对体外人外周血树突状细胞(DC)成熟的影响及免疫调控机制.方法 采集健康成人空腹外周血,分离出单个核细胞,经重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素4刺激诱导产生未成熟DC.将获取的DC分为4组培养和观察,(1)A组:DC培养第1天加入他克莫司;(2)B组:DC培养第1天加入他克莫司,并于细胞培养结束前24 h加入脂多糖;(3)C组:DC培养结束前24 h加入脂多糖;(4)D组:为空白对照组,不加他克莫司及脂多糖.培养7d后,对各组DC的生长形态、细胞表型、抗原吞噬能力进行观察和检测,并对DC分泌IL-12的水平及刺激同种T淋巴细胞增殖能力进行鉴定.结果 DC培养第7天,各组DC形态并无显著差异,密集程度亦未见明显区别.C组细胞CD11c、CD80、CD86、HLA-DR表型表达阳性率分别为(66.1±2.4)%、(48.5±1.3)%、(63.1±2.3)%和(73.1±2.4)%,D组分别为(61.9±6.7)%、(6.7±0.47)%、(25.6±4.7)%和(35.5±1.0)%,两组间均有明显差异(P<0.05);与C组比较,A组和B组CD11c和CD80的表达阳性率存在显著差异(P<0.05);与D组比较,A组和B组的CD11c和CD80表达明显减弱(P<0.05),CD86和HLA-DR表达明显增高(P<0.05);而A组与B组间各表型的表达均无明显差异(P>0.05).A组、B组、C组、D组DC培养上清液中IL-12水平分别为(26.5±1.3)pg/ml、(28.1±1.23) pg/ml、(33.6±2.2)pg/ml和(26.1±3.4)pg/ml,C组均明显高于其他3组(P<0.05);A组、B组和D组的IL-12水平均较低,且3组间无明显差异(P>0.05).在各组混合淋巴细胞反应中,A组与B组的增殖指数无显著差异(P>0.05);与C组相比,A组和B组T淋巴细胞的增殖反应受到明显抑制.A组、B组、C组、D组DC的OVA抗原表达量分别为(74.2±6.8)%、(71.7±3.6)%、(45.8±2.6)%、(62.6±2.7)%.与A组、B组、D组比较,C组OVA抗原表达量均显著降低(P<0.05);A组、B组和D组的OVA抗原表达量均较高,且3组间无明显差异(P>0.05).结论 他克莫司能够抑制人外周血DC的成熟.
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