双重荧光定量RT-PCR法检测柯萨奇病毒A2和A5型

• 作 者: 李静云 崔大伟 谢国良 成军 孙长贵 王国政 金美彤 沈雄文
• 机 构: 浙江大学医学院附属第一医院检验科,中国人民解放军第117医院检验科
• 出 处: 临床检验杂志
• 发表日期: 2015年5期
• 关键词: 手足口病 荧光定量PCR 柯萨奇病毒 柯萨奇病毒A2型 柯萨奇病毒A5型 hand-foot-and-mouth disease fluorescent qu
• 基金项目: “十二五”国家科技重大专项（2012ZX10004-210）

目的建立同时检测柯萨奇病毒A2和A5型（CVA2、CVA5）的双重实时荧光定量RT-PCR法。方法用Primer Express3.0软件设计高度特异性引物和荧光标记探针。通过优化反应体系,建立标准曲线,并评价双重荧光定量RT-PCR法的特异性、灵敏度和重复性。用建立的方法检测367例疑似手足口病患儿的粪便标本,并对阳性结果测序验证。结果荧光定量RT-PCR结果表明本实验所选的引物和探针可特异性检测并区分出CVA2、CVA5亚型,与其他肠道病毒的阳性核酸未发生交叉反应。该方法最低检测限达到10^2copi