兔胰腺干/祖细胞的分离培养和鉴定

• 作 者: 张慧茹 冯若鹏 刘雨潇 庞全海 窦忠英
• 机 构: 国家干细胞研究中心陕西分中心,国家干细胞研究中心陕西分中心,国家干细胞研究中心陕西分中心
• 出 处: 农业生物技术学报
• 发表日期: 2005年6期
• 关键词: 胰腺干细胞 兔 胰岛素 分离 鉴定 pancreatic stem cells rabbit insulin isolation identity

采取1～9日龄的实验仔兔胰腺,1 mg/mLⅣ型胶原酶消化,低糖DMEM培养.细胞铺满后进行传代20代以上冻存.对2～3代的细胞进行免疫组化染色,诱导向β细胞分化并进行高糖刺激胰岛素分泌.结果表明,兔的胰腺干/祖细胞具有较强的增殖能力;免疫组化染色表现为PDX-1、CK19、nestin和胰高血糖素阳性;分化诱导2 d后,双硫腙染色(DTZ)20%阳性,6 d后迅速增加到80%;高糖刺激诱导细胞具有胰岛素释放能力.通过免疫组化染色和诱导细胞胰岛素分泌实验证明分离的是兔胰腺干/祖细胞.首次报道兔胰腺干/祖细