【摘 要】
：
基于RNA适配体与3,5-二氟-4-羟基亚苄基咪唑啉酮(DFHBI)复合物的荧光特性,结合羧酸酯酶2A(CES2A)的底物偏好性,采用计算机虚拟筛选和实验相结合的策略设计,研发了一种CES2A新
【机 构】
：
上海中医药大学交叉科学研究院,上海201203;上海中医药大学附属普陀医院,上海200062
论文部分内容阅读
基于RNA适配体与3,5-二氟-4-羟基亚苄基咪唑啉酮(DFHBI)复合物的荧光特性,结合羧酸酯酶2A(CES2A)的底物偏好性,采用计算机虚拟筛选和实验相结合的策略设计,研发了一种CES2A新型生化传感器.首先,以DFHBI为母核,借助计算机虚拟筛选技术预测了系列DFHBI羧酸酯类衍生物作为CES2A候选底物的潜力.其次,对排名前三位的潜在底物进行合成,并对其化学稳定性和特异性进行了评价,发现3,5-二氟-4-羟基亚苄基咪唑啉酮苯甲酸酯(Ph-DFHBI)对目标酶CES2A显示出极高的特异性和灵敏度.进一步借助同工酶水解实验发现,Ph-DFHBI仅可被CES2A特异性水解,并释放出DFHBI,而人体分布的其它高丰度水解酶(羧酸酯酶1A(CES1A)、乙酰胆碱酯酶(BchE)、丁酰胆碱酯酶(AchE)等)难以水解Ph-DFHBI.进一步在重组单酶和肝组织制备物中考察了CES2A-水解Ph-DFHBI的酶促反应动力学.在生理条件(pH 7.4,37℃)下,CES2A介导的Ph-DFHBI水解反应显示出极高的亲和力和较快的反应速率,Km=0.66μmol/L,Vmax=18.92 nmol/(min·mg).在最佳反应条件下,基于Ph-DFHBI的传感器检测CES2A的检出限为14.5 ng/mL.将此生化传感器应用于组织微粒体等复杂生物体系中CES2A活性的快速检测,以及CES2A抑制剂的高通量筛选与评价,均显示出良好的实用性.本研究设计了一种CES2A新型生化传感器,为探究复杂生物体系中CES2A的生物学功能及CES2A调控剂的高效发现提供了有力工具.
其他文献
短期利率期货是以货币市场上的各类债务凭证为标的的期货合约,包括期限在一年以内的各种商业票据期货、国库券期货及欧洲美元定期存款期货等。由于各种债务凭证对利率极其敏
建筑模板工程中的高支模板施工必须以现代建筑项目工程标准和要求为基础,同时严格按照施工要求和技术规范施工,从而保障现代建筑项目工程的顺利实施.基于此,本文概述了高大模
房屋建筑作为国家发展的刚性需求,针对区域性的建筑体系完善,以及生产、生活的优化,都能够产生较大的积极影响.近几年的房屋质量引起高度关注,钢筋混凝土结构施工,开始成为主
近年来，随着中国汽车产业的逐步开放和部分消费者对高档汽车需求的持续增长，中国汽车工业从重“量”迈向“质、量”并重的新阶段，市场逐渐向高端转移，高档汽车更受重视，成为企业利
在高支模施工技术应用中,该技术的应用难度和危险性相对较高,所以必须做好对相关施工工艺和施工技术的研究和分析,切实保证技术工艺的规范性,严格按照既定的是工艺要求和技术
预制装配式建筑和传统建筑相比具有很多优势,已经被广泛应用到现代建筑当中.装配式混凝土结构件的施工方法是装配式施工的重要环节,直接决定了装配式的稳定性、延展性以及抗
采用Hendery建模理论,基于协整分析方法,运用平滑方法对经济变量进行处理和筛选,建立了以供给侧生产模块为核心,向消费、投资、进出口、货币资本、政府和汇率市场这六个模块
本文研究的重点主要是对吉林省网通3G项目投资经济效果进行评价,本项目经济评价的任务就是根据吉林网通3G项目的预期目标和所拥有的资源条件,分析该项目的现金流情况,分析该
将Taqman微流控芯片技术应用于实时荧光PCR平台的转基因玉米17种品系高通量检测.在一次PCR扩增过程中,以2个玉米内源基因(hmgA基因、adh1基因)和1个上样控制基因(18S基因)为
目的:探讨甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate，DAG)对慢性脑低灌注所致认知功能障碍中的保护作用和机制。方法:73只雄性SPF Sprague Dawley (SD)大鼠，分为假手术组(sham组)