家蚕C类清道夫受体BmSR-C的基因克隆、原核表达及亚细胞定位

• 作 者: 申利 许川 张蕾 张奎 毛景欣 潘光照 李重阳 胡仁建 杨丽
• 机 构: 西南大学
• 出 处: 昆虫学报
• 发表日期: 2018年10期
• 关键词: 家蚕 BmSR-C 表达分析 原核表达 亚细胞定位 Bombyx mori BmSR-C expression profiling prokaryotic ex
• 基金项目: 国家自然科学基金项目(31672496,31802142),中国博士后科学基金(2017M620408),重庆自然科学基金项目(cstc2016jcyjA0425),重庆高校创新团队建设计划(CXTDX201601010)

【目的】本研究旨在克隆与鉴定家蚕Bombyx mori C类清道夫受体基因BmSR-C,为探析其在家蚕免疫中的功能奠定基础。【方法】利用RACE技术克隆家蚕C类清道夫受体基因全长序列,并对其进行生物信息学分析。利用RT-PCR和qPCR方法对BmSR-C基因的时空表达情况进行检测。通过原核表达和Ni+亲和层析的方法获得BmSR-C重组蛋白,免疫昆明小鼠制备抗BmSR-C多克隆抗体。利用ELISA法和Western blot分别对鼠抗BmSR-C蛋白多克隆抗体的效价和特异性进行检测。构建家蚕BmSR-C的真