【摘 要】
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目的:研究P53反义RNA对肝癌细胞中突变型P53致癌性的抑制效应,为肝细胞癌基因治疗提供新的方法.方法:2.1的人全长cDNA用EcorRⅠ和XbaⅠ的双酶切得到 1694bp长cDNA片段,反向插
【机 构】
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北华大学医学院病理解剖教研室,吉林,132001;北华大学医学院分子生物学教研室,吉林,132001
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目的:研究P53反义RNA对肝癌细胞中突变型P53致癌性的抑制效应,为肝细胞癌基因治疗提供新的方法.方法:2.1的人全长cDNA用EcorRⅠ和XbaⅠ的双酶切得到 1694bp长cDNA片段,反向插入哺乳动物表达载体PCR3.1,得到P53反义表达载体PCR3.1-P53(AS),并将其导入人肝细胞株Bel-7402(内源性突变型P53),采用MTT法和FCM方法测定PCR3.1-P53(AS)表达的P53反义RNA对Bel-74 02细胞生长的影响.结果:带有PCR3.1-P53(AS)的Bel-7402细胞,与对照组 Bel-7402细胞和带PCR3.1空载体的Bel-7402细胞比,增殖速度下降,FCM的结果也证明实验组细胞大部分受阻于G0/G1期,与细胞对照组及载体对照组有显著的差异.结论:P53反义RN A可有效地抑制肝细胞癌中突变型P53的致癌性,可用于肝细胞癌实验性基因治疗研究.
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