表达结核特异性Vγ9Vδ2 TCR双链单体的果蝇S2恒定细胞系的构建和鉴定

• 作 者: 涂晓欣 张洁 孟繁荣 方毅敏 杨芳芳 赖小敏
• 机 构: 510080 广州，中山大学中山医学院微生物学教研室，热带病防治研究教育部重点实验室，海洋微生物功能分子广东省高校重点实验室，广东省重大传染病预防和控制技术中心,510080 广州，中山大学中山医学院
• 出 处: 中华微生物学和免疫学杂志
• 发表日期: 2015年35期
• 关键词: γδT细胞受体 双链单体 S2细胞

目的

转染及筛选鉴定能够稳定表达和分泌Vγ9Vδ2 T细胞受体(TCR)双链单体的果蝇S2恒定细胞系。

方法

利用氯化钙转染法将TCR γ9-FB-pMT/V5-His B质粒、TCR δ2-JB-pMT/V5-His A质粒、pMT/Bip-BirA质粒和pCoHygro潮霉素质粒转染进S2细胞中，用潮霉素B筛选恒定细胞系后表达生物素化的结核特异性Vγ9Vδ2 TCR双链单体，并加以鉴定。

结果

斑点印迹试验、SDS-PAGE和Western blot表明细胞培养上清中有Vγ9Vδ2 TCR单体，且已被成功生物素化。

结论

成功筛选出能稳定分泌表达Vγ9Vδ2 TCR的果蝇S2恒定细胞系，为研究γδ T细胞的免疫识别提供实验资料。