人参SQE基因干扰载体的构建及转化

• 作 者: 于彦婷 任丽 孙春玉 蒋世翠 王义 张美萍
• 机 构: 吉林农业大学生命科学学院细胞工程实验室
• 出 处: 中国医药生物技术
• 发表日期: 2011年2期
• 关键词: 人参 基因 药物载体 皂苷类 GINSENG Genes Drug carriers SAPONINS

目的探讨SQE基因对人参皂苷合成的影响。方法根据SQE基因保守区序列，分别设计合成其正反义片段引物行RT-PCR扩增，扩增产物分别与pMD18-T质粒连接后转化E．coliDH5a，获得的pMD18-T-SQE—S、pMD18-T-SQE．A重组质粒经双酶切后，将正反义片段与质粒pMHZll2反向连接，转化E．coliDH5α，构建SQE基因RNAi双元表达载体pMHZl12-SQE。电击法将鉴定正确的重组质粒pMHZl12-SQE转化农杆菌GV3101感受态细胞，再利用农杆菌介导法转化人参愈伤组织，提取