可溶性环氧化物水解酶抑制剂可抑制小鼠巨噬细胞泡沫化

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目的 观察可溶性环氧化物水解酶抑制剂t-AUCB对小鼠巨噬细胞泡沫化及胆固醇流出率的影响,明确t-AUCB是否可抑制泡沫细胞的形成.方法 培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,分组为空白对照组、不同浓度t-AUCB干预组、100 μmol/L t-AUCB+ GW9662组.t-AUCB干预组再分为4个亚组,分别用不同浓度t-AUCB(1,10,50,100 μmol/L)干预24h.100 μnol/L t-AUCB+ GW9662组为在t-AUCB前1h加入过氧化物酶增殖体激活型受体γ(PPARγ)拮抗剂GW9662 5μmol/L.采用油红O染色鉴定泡沫细胞的形成,液体闪烁计数器检测各组细胞3氚标记胆固醇(3 H-Cholesterol)的流出率.实时PCR和免疫印迹法分别测定巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运子A1( ABCAl) mRNA和蛋白的表达.结果 油红O染色24h后,空白对照组细胞大量红染,t-AUCB组细胞红染明显少于空白对照组(P<0.05).100 μmol/L t-AUCB+GW9662组细胞大量红染,显著多于100 μmol/Lt-AUCB组(P<0.05).空白对照组胆固醇流出率为(5.91±0.18)%.1、10、50和100 μmol/Lt-AUCB干预组胆固醇流出率分别为(7.03±0.33)%、(8.05±0.32)%、(9.04 ±0.14)%和(10.06±0.85)%,均明显高于空白对照组(P均<0.05).100 μmol/L t-AUCB+ GW9662组胆固醇流出率为(6.33±0.15)%,明显低于100 μmol/L t-AUCB组,P<0.05.各浓度t-AUCB干预组小鼠巨噬细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达均明显高于空白对照组,P均<0.05,100 μmol/L t-AUCB+ GW9662组ABCA1 mRNA和蛋白表达显著低于100 μmol/L t-AUCB组,P<0.05.结论 t-AUCB可通过PPARγ-ABCA1途径改善巨噬细胞胆固醇流出,抑制巨噬细胞内胆固醇过度蓄积,从而抑制泡沫细胞的形成.
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