【摘 要】
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<正> 鼠源性单克隆抗体(mAb)应用于人体治疗首先需对其进行基因工程化改造。目前,常用的克隆mAb可变区基因的方法,是利用抗体可变区内骨架区(FR)序列的保守性,设计一组通用引
【机 构】
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军事医学科学院基础医学研究所; 军事医学科学院基础医学研究所 北京 100850; 北京 100850; 北京 100850;
【基金项目】
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国家“863”计划课题基金资助(No.2001AA215081)
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<正> 鼠源性单克隆抗体(mAb)应用于人体治疗首先需对其进行基因工程化改造。目前,常用的克隆mAb可变区基因的方法,是利用抗体可变区内骨架区(FR)序列的保守性,设计一组通用引物,采用RT-PCR法扩增可变区基因[1,2]。但由于引物的简并性,克隆过程中将不可避免地改变抗体可变区两侧(FR1、FR4)的氨基酸序列,这些改变可能导致基因工程抗体亲和力降低[3]。我们对传统方法进行了改进,采用5’-RACE(rapid amplification of cDNA end,RACE)克隆的策略,获得了抗人CD16 mAb轻链可变区(VL)基因的真实序列。
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