【摘 要】
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目的基于ITS序列建立北柴胡掺伪藏柴胡的分子鉴别方法。方法收集北柴胡、藏柴胡样品,提取基因组DNA,用ITS通用引物进行测序,通过DNAMAN软件进行序列比对,根据藏柴胡特异性位
【基金项目】
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甘肃省食品药品监督管理局科研项目(2020GSMPA024)。
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目的基于ITS序列建立北柴胡掺伪藏柴胡的分子鉴别方法。方法收集北柴胡、藏柴胡样品,提取基因组DNA,用ITS通用引物进行测序,通过DNAMAN软件进行序列比对,根据藏柴胡特异性位点用Primer Premier 5.0软件设计特异性鉴别引物,并优化特异性PCR反应条件。结果在位点特异性PCR反应条件考查中,退火温度为65℃(20 s)、引物量为0.4μL、循环次数为30时特异性最佳,该方法适用于不同DNA聚合酶且重现性较好,掺伪检出限为1%。结论该研究设计的位点特异性引物在一定条件下的PCR反应中,仅藏柴
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